酵母β-葡聚糖含量化學比色法定量檢測試劑盒

酵母β-葡聚糖含量化學比色法定量檢測試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

酵母β-葡聚糖含量化學比色法定量檢測試劑是一種旨在通過染料剛果紅與β-D-葡聚糖結合沉淀，產生吸光峰值的變化，來測定樣品中β-葡聚糖濃度的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種培養酵母菌種β-葡聚糖的含量檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。

產品內容

萃取液（Reagent A）          500毫升

稀釋液（Reagent B）         120毫升

反應液（Reagent C）        15毫升

標準液（Reagent D）          2毫升

產品說明書              1份

保存方式

保存 標準液（Reagent D）在－20℃冰箱里；其余的保存在4冰箱里；反應液（Reagent C）避免光照；有效保證6月

用戶自備

15毫升錐形離心管：用于樣品操作的容器

1.5毫升離心管：用于標準液配制或反應的容器

（微型）臺式離心機：用于樣品操作

電爐：用于煮沸孵育

比色皿或96孔板：用于染色后比色檢測的容器

分光光度儀或酶標儀：用于比色分析

實驗步驟

一、 樣品準備

1． 準備好5毫升待測的新鮮酵母細胞（OD600＝1.0，即1 X 10⁸細胞/毫升）

2． 移入到15毫升錐形離心管

3． 放進4℃臺式離心機離心5分鐘，速度為1000g

4． 小心抽去上清液

5． 加入5毫升萃取液（Reagent A）

6． 渦旋震蕩15秒

7． 煮沸水浴里孵育5分鐘

8． 渦旋震蕩15秒

9． 加入5毫升萃取液（Reagent A）

10． 渦旋震蕩15秒

11． 放進臺式離心機離心10分鐘，速度為1000g

12． 小心抽去上清液

13． 加入10毫升萃取液（Reagent A）

14． 渦旋震蕩15秒

15． 放進臺式離心機離心10分鐘，速度為1000g

16． 小心抽去上清液

17． 加入5毫升稀釋液（Reagent B），混勻

18． 置于冰槽里備用

二、 測定準備

1． 準備好待測樣品，置于冰槽里

2． 設定好分光光度儀或酶標儀（溫度為25℃）：波長540nm，并置零 

3． 準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至5號管

4． 按照下表配制標準液

5． 將1至5號管置于室溫下備用；標準管濃度見下表

三、 標準曲線測定

1． 加入500微升上述配制的標準液到1.5毫升離心管

2． 加入500微升反應液（Reagent C）

3． 渦旋震蕩15秒

4． 轉移到比色皿或96孔板

5． 即刻放進分光光度儀或酶標儀檢測：獲得吸光讀數

6． 重復實驗步驟1至5四次

7． 構建標準曲線：縱座標（Y軸）為吸光讀數（OD）；橫座標（X軸）為標準β-葡聚糖含量（微克）

四、 樣品測定

1． 加入500微升上述制備的待測樣品到1.5毫升離心管

2． 加入500微升反應液（Reagent C）

3． 渦旋震蕩15秒

4． 轉移到比色皿或96孔板

5． 即刻放進分光光度儀或酶標儀檢測：獲得相對吸光讀數（OD）

6． 根據標準曲線獲得樣品對應β-葡聚糖含量（微克）

五、 計算樣品濃度

[根據標準曲線獲得樣品對應β-葡聚糖濃度（微克）X樣品稀釋倍數]÷0.5（樣品容量；毫升）＝微克/毫升÷10⁸細胞/毫升＝微克10⁸細胞

注意事項

1． 本產品為25次操作，包括標準樣

2． 本產品檢測范圍是100至1000微克β-克葡聚糖

3． 操作時，須戴手套

4． 比色測定后，比色皿須清洗

5． 如果待測樣品濃度過高或過低，可以調整樣品濃度

6． 本公司提供系列葡聚糖檢測相關試劑產品

質量標準

1． 本產品經鑒定性能穩定

2． 本產品經鑒定檢測敏感

用 途: 本品用于科學研究使用。

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