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向培養(yǎng)基細(xì)胞里面加入生長(zhǎng)因子的方法討論

時(shí)間:2014/8/19閱讀:4863
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向培養(yǎng)基細(xì)胞里面加入生長(zhǎng)因子的方法討論

  生長(zhǎng)因子絕大多數(shù)哺乳類胚胎神經(jīng)元有嚴(yán)格的營(yíng)養(yǎng)要求,若不能提供適宜的生長(zhǎng)因子或合適的因子組分,將會(huì)使絕大多數(shù)神經(jīng)元在體外培養(yǎng)的數(shù)天中死亡。解決這一問(wèn)題有兩條思路,一是讓培養(yǎng)基細(xì)胞提供自己的營(yíng)養(yǎng)因子,二是在培養(yǎng)基中加入純的生長(zhǎng)因子。如果細(xì)胞混合物能在高密度時(shí)生長(zhǎng),所需的生長(zhǎng)因子便會(huì)積累到可觀的數(shù)值,尤其當(dāng)培養(yǎng)基很少變化時(shí)。若某種細(xì)胞混合物生長(zhǎng)時(shí)有很少的營(yíng)養(yǎng)需求,可保持培養(yǎng)基在一段時(shí)間里不作任何變動(dòng),以使?fàn)I養(yǎng)(生長(zhǎng))因子積累,而zui后促使所需要的細(xì)胞類型能夠生長(zhǎng)。但是,這種對(duì)營(yíng)養(yǎng)(生長(zhǎng))因子自身倚賴性亦有弊端,因?yàn)橥ǔT诨旌霞?xì)胞群體中細(xì)胞很難有同比例增殖,某些細(xì)胞會(huì)因生長(zhǎng)條件的貧乏而受限制。另外,這種方法只能進(jìn)行相當(dāng)高密度的細(xì)胞培養(yǎng)。因?yàn)榕囵B(yǎng)基的條件在細(xì)胞的較低密度時(shí)變的不夠有效。不過(guò)某些時(shí)候純化神經(jīng)元群體的低密度培養(yǎng)可用條件培養(yǎng)基(經(jīng)過(guò)了高密度培養(yǎng))進(jìn)行,或在膠質(zhì)上生長(zhǎng)的神經(jīng)元所用過(guò)的培養(yǎng)基來(lái)支持。

  滿足神經(jīng)元營(yíng)養(yǎng)需求的第二條途徑是向培養(yǎng)基中加入生長(zhǎng)因子。通常用于組培的通用適宜因子是神經(jīng)生長(zhǎng)因子NGF。不過(guò),只有少數(shù)對(duì)這種蛋白質(zhì)有反應(yīng)的細(xì)胞類型的細(xì)胞才能生長(zhǎng)。

含225ml LB肉湯均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于李斯特氏菌制樣和前增菌培養(yǎng)(GB 標(biāo)準(zhǔn))
LB Broth
萘啶酮酸 5.0mg/支*5 每支添加于225ml HBJ005中制成LB肉湯
Nalidixic Acid
吖啶黃素 3.0mg/支*5 培養(yǎng)基每支添加于225ml HBJ005中制成LB肉湯
Acridine Flavin
含225ml FB增菌液均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于李氏菌前增菌培養(yǎng)(SN 標(biāo)準(zhǔn))
FB Broth
FB(Half-Fraser)添加劑(A、B) 2ml/支*40 每支添加到225ml HBJ006中
FB additive(A、B)
含225ml GN增菌液均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
GN Enrichment Broth
含00ml GN增菌液均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
GN Enrichment Broth
含225ml志賀氏菌増菌肉湯均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于志賀氏菌前增菌培養(yǎng)
Shigella Enrichment Broth
新生霉素 ml/支*5 每支添加于225ml HBJ8663中
Novobiocin
培養(yǎng)基含225ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于金葡菌前增菌培養(yǎng)
7.5% NaCl Broth
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于金葡菌增菌培養(yǎng)
7.5% NaCl Broth
含225ml 0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于金葡菌前增菌培養(yǎng)
0% NaCl Trypticase Soy Broth
含225ml布氏肉湯均質(zhì)袋 0個(gè)/包 用于空腸彎曲菌的前增菌
Brucella Broth

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