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抗體
生物試劑
細胞
菌株
血清
細胞分離試劑
試劑盒
PCR技術:樣品處理與注意事項2017/8/16
一、樣品處理DNA是染色體的主要組成部分,是PCR的擴增模板。要進行PCR,研究DNA結構與功能或者用于診斷目的,首先必須從生物體內提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在,其分子量大(人的染色體DNA...
PCR反應程序2017/8/14
1.常規程序將PCR反應所需的成分配置完后,在PCR儀上于94-96℃預加熱幾十秒至幾分鐘,使模板DNA充分變性,然后進入擴增循環。在每一個循環中,先于94℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復性...
PCR Trouble shooting guide2017/8/7
1.假陰性,不出現擴增條帶pcr反應的關鍵環節有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量,④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。模板:①模板中含有雜蛋白質,②模板中含有Ta...
PCR引物設計的原則與要點2017/8/2
引物設計有3條基本原則:首先引物與模板的序列要緊密互補,其次引物與引物之間避免形成穩定的二聚體或發夾結構,再次引物不能在模板的非目的位點引發DNA聚合反應(即錯配)。引物設計應注意如下要點:1引物的長...
隨機引物PCR技術2017/7/24
一.實驗原理聚合酶鏈式反應(Polymerasechainreaction)簡稱PCR,它是一種DNA體外擴增技術。1985年美國的Mullis等人發明了PCR技術,在體外利用模板DNA、特定的寡聚核...
哺乳動物細胞總RNA的分離2017/7/18
一、細胞的裂解單層細胞的裂解懸浮培養的細胞或組織單細胞懸液的裂解a.單層細胞的裂解a)吸出培養液,以7ml用冰預冷的無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液PBS沖洗細胞培養皿內的單層細胞,重復1次,將平板置于冰上直...
DNA序列分析(Sanger酶法)2017/7/10
一、試劑1、10×TBE(pH8.3):2、46%尿素溶液:3、20%聚丙烯酰胺溶液4、10%過硫酸胺5、引物6、模板7、DNA聚合酶8、放射性標記的dNTP和ddNTP貯存液9、TEMED二、操作方...
RNAi的特點與生物學功能2017/7/4
RNAi所產生的基因沉默具有如下特點:1)性。Elbashir等在研究中發現分別為25nmol/L與100nmol/L的起始雙鏈RNA產生的結果是一樣的,只是高濃度起始的更有效些。將雙鏈RNA濃度降低...
脊髓動物細胞中特殊的RNAi現象2017/6/29
1.由長dsRNA引起的非特異性基因沉默尋找哺乳動物細胞中存在RNAi的證據頗費了一番周折。將較長的dsRNA(超過30個堿基對)轉染幾種特定脊髓動物細胞系統如小鼠的早期胚胎中,斑馬魚和中華倉鼠卵巢細...
RNA操作注意事項與實驗技巧2017/6/26
操作注意事項:由于rna酶的廣泛存在與難以滅活的頑固特性。使得RNA的提取純化和后續工作變得非常困難。為了保證RNA的研究工作成功,請仔細閱讀下列注意事項,相信它能幫助您解決常見的問題。歸根究底,RN...
質粒DNA的分離、純化和鑒定2017/6/22
把一個有用的目的DNA段通過重組DNA技術,送進受體細胞中去進行繁殖和表達的工具叫載體(Vector)。細菌質粒是重組DNA技術中常用的載體。質粒(Plasmid)是一種染色體外的穩定遺傳因子,大小從...
PCR技術應用進展2017/6/15
原位PCR就是在組織細胞里進行pcr反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術.原位PCR是Hasse等于1990年...
PCR反應體系與反應條件2017/6/12
標準的pcr反應體系:10×擴增緩沖液10ul4種dNTP混合物各200umol/L引物各10~100pmol模板DNA0.1~2ugTaqdna聚合酶2.5uMg2+1.5mmol/L加雙或三蒸水至...
穿孔技術在動物克隆及轉基因中的應用2017/6/7
InstituteofOrthopedicOncology,FourthMilitaryMedicalUniversity,Xi"an710038,China摘要電穿孔技術利用電場造成細胞膜的改變從而...
士鋒分子生物學的三部分研究內容2017/5/31
分子生物學主要包含以下三部分研究內容:1核酸的分子生物學核酸的分子生物學研究核酸的結構及其功能。由于核酸的主要作用是攜帶和傳遞信息,因此分子遺傳學(moleculargenetics)是其主要組成部分...

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