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FAM
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AF染料

百螢——鈣黃綠素紅,AM

時間:2023/5/22閱讀:44
分享:

英文名稱:Calcein Red™ AM
產品參數:
Ex (nm)     562       Em (nm)      576
分子量      1015.79   溶劑          DMSO
存儲條件    在零下15度以下保存, 避免光照
產品規格    1mg
產品貨號    21900
產品概述:
鈣黃綠素紅,AM是美國AAT Bioquest生產的用于檢測活細胞的熒光探針Calcein AM是用于標記和檢測活細胞細胞功能的流行的熒光探針之一。
然而,Calcein AM的單色使得在多色應用中不可能使用這種有價值的試劑。
例如,由于與GFP相同的顏色,不可能將Calcein AM與GFP-轉化細胞組合使用。
為了解決Calcein AM的這種顏色限制,我們開發了Calcein Orange ,Calcein Red 和Calcein Deep Red 。
這些新的Calcein AM類似物與Calcein AM結合使用,可以對活細胞進行多色標記和功能分析。
非熒光Calcein Red AM可以輕松進入活細胞并水解產生強熒光Calcein Red 染料。可以使用常見的TRITC / Cy3濾波片組檢測Calcein Red 染料。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的鈣黃綠素紅,AM。

光譜: 

鈣黃綠素.png






2.適用儀器
流式細胞儀
Ex:532/561 nm
Em:585/40   nm 
熒光顯微鏡
Ex:       TRITC 濾波片組
Em:    TRITC 濾波片組
推薦孔板: 黑色透明底板

熒光酶標儀
Ex:540 nm
Em:590 nm
Cutoff:570 nm
推薦孔板:黑色透明底板
讀取模式:底讀模式

3.實驗方案:
操作步驟
1.準備HHBS緩沖液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高質量無水DMSO中制備2 mM至5 mM Calcein Red AM原液。
2.1使用Calcein Red AM的量:1毫克
2.2所需濃度:2 mM
2.3在合適的容器中,將1mg Calcein Red TM AM與492.23μL無水DMSO混合。
3.使用10μMCalceinRed AM 4在HHBS中制備2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM*磺舒。
3.1終孔內濃度的Calcein Red AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的終井內濃度:0.04%
3.3終孔內濃度的*磺舒:1mM
3.4在合適的容器中,混合16μL的Calcein Red AM,25.6μL的10%Pluronic F-127和256μL的25mM*磺舒。然后,添加HHBS或您選擇的緩沖液,直到體積為3.2 mL。
注意:對于大多數細胞系,我們建議Calcein Red AM的終度為4至5μM。
注意:推薦的Pluronic F-127孔濃度為0.02%至0.04%。
注意:推薦的濃度為1至2.5 mM的Probenecid。
 
4.將100μL染料工作溶液加入已經含有100μL培養基的所需孔中。
4.1該步驟將染料工作溶液從2X稀釋至1X,并將每種組分的終濃度調節至以下:5μM的Calcein Red AM,0.04%Pluronic F-127,1mM*磺舒。
5.孵育染料
5.1將染料加載板在細胞培養箱中孵育20-60分鐘。
5.2將染料加載板在室溫下孵育30分鐘。
6.用1.0 mM Probenecid準備HHBS緩沖液(或您選擇的緩沖液)。
6.1在合適的容器中加入160μL的25mM*磺舒。然后,添加HHBS或您選擇的緩沖液,直到體積為4 mL。
7.用HHBS緩沖液或您選擇的緩沖液替換染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,從所需孔中除去200μL染料工作溶液和培養基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM*磺舒的HHBS(或您選擇的緩沖液)。 
8.運行實驗
8.1為您的樣品添加所需的處理。
8.2以Ex / Em = 560/574 nm運行實驗

5.相關產品
產品名稱           貨號
鈣紅素醋酸鹽                             Cat#22010
鈣黃綠素, AM                            Cat#22002
鈣黃綠素, AM 超純級            Cat#22003


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