細(xì)胞：GES-1細(xì)胞
中文名稱：人胃粘膜細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
研究慢性癲痛大鼠點燃時海馬星形膠細(xì)胞的激活情況.
方法:
采用馬桑內(nèi)酯慢性癲癇大鼠模型,觀察大鼠點燃后海馬NF-κBp65和膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)(immunoreactivity,IR)的變化.
結(jié)果點燃后1h,海馬CA1區(qū)GFAP-IR開始增強(qiáng),4-8h可觀察到GFAP-IR陽性細(xì)胞數(shù)量增多并明顯濃染,這種強(qiáng)GFAP-IR持續(xù)至點燃后24h；
點燃后1h,NF-κBp65即可在海馬CA1區(qū)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)表達(dá),主要位于胞核內(nèi),至8 h陽性神經(jīng)元細(xì)胞核基本消失而可見大量NF-κBp65-IR陽性的膠質(zhì)細(xì)胞；
雙重免疫細(xì)胞化學(xué)方法顯示GFAP/NF-κBp65-IR陽性細(xì)胞在點燃后1h即可觀察到,4h達(dá)高峰,24 h恢復(fù)至對照水平.
結(jié)論馬桑內(nèi)酯慢性致癇大鼠點燃時星形膠質(zhì)細(xì)胞表現(xiàn)出一種早期而持續(xù)的激活,提示反復(fù)激活的星形膠質(zhì)細(xì)胞對癲癇的復(fù)發(fā)可能起重要的作用.
