細胞:H441細胞
中文名稱:人肺腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復(fù) 1 項操作或凍存。
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由于有潛力生成一些具有特定功能的特化細胞,干細胞在醫(yī)學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域具有重要的價值。干細胞生成這些分化細胞的能力對于機體的正常維持、生長及修復(fù)至關(guān)重要。
許多的組織具有兩種干細胞群:一種很少分裂,稱作為靜息干細胞;另一種更易于增殖,稱作為始發(fā)態(tài)干細胞(primed stem Cell)。
無論它們的增殖頻率如何,人類的大多數(shù)干細胞都不會直接生成分化的子細胞;它們會生成一種中間增殖細胞群即TACs。
毛nang是生成毛發(fā)的一種微小器官,其形成狹窄毛nang管腔向下伸入到皮膚里。毛nang不斷地在生長、破壞和靜息狀態(tài)之間循環(huán)。當進入到生長期時,始發(fā)態(tài)干細胞群總是首先分裂并生成TACs,這些TACs在毛nang中向下聚集。
始發(fā)態(tài)干細胞增殖為下一輪的毛發(fā)生長創(chuàng)造了條件,確保了隨時間損失的毛發(fā)能夠被替換。增殖TACs則生成了毛干,以及皮膚下毛發(fā)周圍的所有細胞,這些細胞構(gòu)成了毛nang。
有時候干細胞會打開開關(guān)分裂生成子細胞,有時候則會關(guān)閉開關(guān)維持在靜息狀態(tài)。直到現(xiàn)在科學(xué)家們?nèi)晕赐阓全了解是什么引起了這些細胞在活化和靜息狀態(tài)之間切換。