小鼠巨噬細胞Ana-1細胞
生長特性： 懸浮生長   
培養條件 ：RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法：1:2。3天內可長滿。
傳代情況 ：PN
凍存條件：基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

小鼠巨噬細胞Ana-1細胞細胞復蘇：
1、打開水浴鍋, 預熱到37度
2、從液氮罐中出凍存的細胞，迅速放入37度水浴鍋快速溶解
3、在超凈臺中，把溶解的細胞移入離心管，（離心管內先加入２ＭＬ左右的培養基）．１０００ＲＰＭ 離心５分鐘
4、棄上清，加入１ＭＬ培養基，吹打均勻，移入培養瓶內，（培養瓶內先加入４－５ＭＬ培養基），３７度過５％ＣＯ２培養箱培養
5、第二天，用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

小鼠巨噬細胞Ana-1細胞細胞傳代：
1、當細胞融合度達到90%以上時，給細胞傳代；
2、37°C水浴預熱培養基；
3、在超凈臺中，棄培養基，加入2-5mlPBS清洗細胞后，再加入1ml胰酶消化細胞；
4、顯微鏡下觀察到細胞變圓，有細胞開始脫離瓶壁時，加入5ml培養基終止消化；
5、用移液器輕輕吹下瓶壁上剩余的細胞，并輕輕吹打將細胞吹散；
6、將細胞移入離心管中，1000rpm離心5min；
7、棄上清，加入15-20ml的培養基（含血清）重懸細胞后轉入T75培養瓶中或按適當比例傳到T25瓶中（確保細胞貼壁后融合度在25-50%之間），細胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25瓶），混勻細胞懸液，確保細胞均勻分布；
8、將培養瓶置于37°C，5% CO2的無菌培養箱中培養。

細胞凍存：
1、將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
2、準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配） 或95％ＦＢＳ＋5％ＤＭＳＯ（現用現配）
3、加1.5毫升凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘.  放入-20度冰箱1－3小時后．再放入-80度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
4、原則：慢凍速溶
5、加1.5毫升凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內。

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