1.DMSO:
DMSO是二甲基亞砜,用途廣泛。用作乙炔、芳烴、二氧化硫及其他氣體的溶劑以及腈綸纖維紡絲溶劑。是一種即溶于水又溶于有機溶劑的極為重要的非質子極性溶劑。對皮膚有*的滲透性,有助于藥物向人體滲透。也是一種十分重要的化學試劑。ELISA試劑盒
DMSO也是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,減輕自由基對細胞損害,改變生物膜對電解質、藥物、毒物和代謝產物的通透性。
但是研究表明,DMSO存在嚴重的毒性作用,與蛋白質疏水集團發生作用,導致蛋白質變性,具有血管毒性和肝腎毒性。
DMSO是毒性比較強的東西,用的時候要避免其揮發,要準備1%-5%的氨水備用,皮膚沾上之后要用大量的水洗以及稀氨水洗滌.zui為常見的為惡心、嘔吐、皮疹及在皮膚、和呼出的氣體中發出大蒜、洋蔥、牡蠣味。
吸入:高揮發濃度可能導致頭痛,暈眩和鎮靜。
皮膚:能夠灼傷皮膚并使皮膚有刺痛感,如同所見的皮疹及水泡一樣。若二甲基亞砜與含水的皮膚接觸會產生熱反應。要避免接觸含有毒性原料或物質的二甲基亞砜溶液,因其毒性不為人所知,而二甲基亞砜卻可能會滲入肌膚,在一定條件下會將有毒物質代入肌膚。ELISA試劑盒
吸收:吸收危險性很低。
2.EB:EB(Ethidium bromide,溴化乙錠)
溴化乙錠是一種高度靈敏的熒光染色劑,用于觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠用標準302nm 紫外光透射儀激發并放射出橙紅色信號,觀察瓊脂糖凝膠中DNAzui常用的方法是利用熒光染料溴化乙錠進行染色,溴化乙錠含有一個可以嵌入DNA堆積堿基之間的一個三環平面基團。它與DNA的結合幾乎沒有堿基序列特異性。在高離子強度的飽和溶液中,大約每2.5個堿基插入一個溴化乙錠分子。當染料分子插入后,其平面基團與螺旋的軸線垂直并通過范德華力與上下堿基相互作用。這個基團的固定位置及其與堿基的密切接近,導致與DNA結合的染料呈現熒光,其熒光產率比游離溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm處的紫外輻射并傳遞給染料,而被結合的染料本身吸收302nm和366nm的光輻射。這兩種情況下,被吸收的能量在可見光譜紅橙區的590nm處重新發射出來。由于溴化乙錠-DNA復合物的熒光產率比沒有結合DNA的染料高出20-30倍,所以當凝膠中含有游離的溴化乙錠(0.5ug/ml)時,可以檢測到少至10ng的NDA條帶。溴化乙錠可以嵌入堿基分子中,導致錯配。溴化乙錠是強誘變劑,具有高致癌性!會在60-70度是蒸發(所以不要在膠太熱的時候加,或者應該加到液體里,0.5ug/ml,染色半小時)(當EB加得過多時,也可以在室溫用水將已染色的凝膠浸泡20min以降低未結合的EB引起的背景熒光)。
溴化乙錠溶液的凈化處理:由于溴化乙錠具有一定的毒性,實驗結束后,應對含EB的溶液進行凈化處理再行棄置,以避免污染環境和危害人體健康。ELISA試劑盒
(1) 對于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下處理:
①將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5mg/ml;
②加入一倍體積的0.5mol/L KMnO4,混勻,再加入等量的25mol/L HCl,混勻,置室溫數小時;
③加入一倍體積的2.5mol/L NaOH,混勻并廢棄。
(2)EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下處理:
① 按1mg/ml的量加入活性炭,不時輕搖混勻,室溫放置1小時;
② 用濾紙過濾并將活性碳與濾紙密封后丟棄。