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培養(yǎng)基研究神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞如何進(jìn)行實驗

時間:2014/8/4閱讀:891
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培養(yǎng)基研究神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞如何進(jìn)行實驗

  神經(jīng)細(xì)胞(神經(jīng)元)不易培養(yǎng),只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或加入神經(jīng)生長因子和膠質(zhì)細(xì)胞因子時,可出現(xiàn)一定程度的分化,長出突起等現(xiàn)象,但很難使之增值。而神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)組織中比較容易培養(yǎng)的成分。

  人、鼠等腦組織即可用于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基,不僅能獲得生長的膠質(zhì)細(xì)胞,也可形成能傳代的二倍體細(xì)胞系。一般說來,膠質(zhì)細(xì)胞在培養(yǎng)中生長不穩(wěn)定,不易自發(fā)轉(zhuǎn)化,但對外界因素仍保持很好的敏感性,可用ROUS病毒和SV4等誘發(fā)轉(zhuǎn)化。

  培養(yǎng)方法如下:

  1、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。

  2、置于30—50倍體積的Hanks液中,此時腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液。

  3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反復(fù)二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分。

  4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,通過紗網(wǎng)成紗布過濾,計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度。

  5、接入培養(yǎng)基瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。

  該細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境過程較長,接種后貼壁較慢。貼壁后短期內(nèi)也可能不見細(xì)胞分裂現(xiàn)象,然而一旦生長后即能迅速進(jìn)入旺盛的增殖狀態(tài)。細(xì)胞傳代可以0.25%*消化處理。

用于食品中沙門氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))培養(yǎng)基 MKTTn Broth MKTTn 肉湯 250
用于食品中沙門氏菌生化試驗(FDA標(biāo)準(zhǔn)) Lysine Iron Agar 賴氨酸鐵瓊脂(LIA) 250
用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法) MSRV Medium,Modified 改良MSRV培養(yǎng)基 250
濾膜法食品中沙門氏菌前增菌(SN/T1059.1) SCCRAM Broth SCCRAM肉湯 250
用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法) BPL Agar BPL瓊脂 250
用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(Merck方法) BPLS Agar BPLS瓊脂 250
用于多種標(biāo)本中沙門氏菌檢驗選擇性分離培養(yǎng)(美國和歐洲檢測推薦方法)
用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn)) BPLS Agar,Modified 改良BPLS瓊脂 250
用于動力、吲哚和*試驗(FDA方法) 培養(yǎng)基MIO Medium MIO培養(yǎng)基 250
用于食品中致病菌,特別是沙門氏菌分離培養(yǎng)(Merck方法) XLT4 Agar XLT4瓊脂 250
用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法) D/E Neutralizing Broth D/E中和肉湯 250
用于衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法) D/E Neutralizing Agar D/E中和瓊脂 250
用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)(MERCK方法) M-Broth M –肉湯 250
用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Brilliant Green Agar 煌綠瓊脂 250
用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Brilliant Green Agar w/Sulfadiazine 煌綠黃胺嘧啶瓊脂 250
用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(USDA-FSIS方法) 培養(yǎng)基BGS Agar BGS 瓊脂 250
用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Alkaline Peptone Water 堿性蛋白胨水     250
用于致病性弧菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn)) Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar TCBS瓊脂     250

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