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人瘦素(Leptin)ELISA 檢測試劑盒操作步驟說明

時間:2011/5/3閱讀:1305
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人瘦素(Leptin)ELISA 檢測試劑盒操作步驟

1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6、甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9、在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

人瘦素(Leptin)ELISA 檢測試劑盒性能

1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標

2. 標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。

3. 特異性:不

4. 與人其它細胞因子反應。

5. 重復。

6. 性:板內、板間變異系數均小于10%。

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