當前位置:上海酶聯生物研究所>>技術文章>>上海酶聯告訴您:血清保存時應注意的事項
血清,指血液凝結后,在血漿中除掉纖維蛋白原分離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。其主要效果是供給根本營養物質、供給激素和各種生長因子、供給結合蛋白、供給促觸摸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培育中的細胞起到某些保護效果。
血清的保存應該注意以下幾點:
(1)切勿將血清在37℃放置太久,不然血清會變得污濁,一同血清中的有效成分會破壞而影響血清質量。
(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*凍結的血清.加熱過程中須規矩搖晃均勻.此熱處理的意圖是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉積物明顯增多,并且還會影響血清的質量。補體參加反響有:細胞毒效果, 滑潤肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板開釋組胺, 增強吞噬效果, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。
(3)瓶裝血清凍結需采用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉積的發作.切勿直接將血清從-20℃進入37℃凍結,這樣因溫度改變太大,簡單造成蛋白質凝集而出現沉積。
(4)一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培育液內一同過濾,切勿直接過濾血清。
(5)血清中的沉積物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及凍結后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清自身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉積物的構成會明顯增多.有些沉積物在顯微鏡下調查象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果置疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清。
(6)需要長時間保存的血清必須貯存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.因為血清結冰時體積會添加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留必定體積空間,不然易發作污染或玻璃瓶凍裂。
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