ELISA試劑盒實驗血清為何要稀釋？有兩個原因：
1，比賽克制比照明顯，應稀釋比賽物；
2，以下降非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假設你嫌費事我覺得用生理鹽水替代PBS聯絡也不大。不論你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數必定要事前斷定，但也不用一點點，你做一個預實驗即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來的曲線比照活絡。
ELISA試劑盒實驗稀釋血清的過程：
先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這么可以大體斷定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板，再用必定稀釋度的陽性參看血清和陰性參看血清進行孵育后洗刷，再加酶聯絡物進行反應，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應后分別測定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般老是要選擇那個O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值懇求<0.1-0.2。也就是懇求陽性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒是以免疫學反應為根底，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相聯絡起來的一種敏感性很高的實驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每參與一種試劑孵育后，可通過洗刷除去剩下的游離反應物，然后保證實驗效果的特異性與穩定性。在實踐運用中，通過不一樣的規劃，具體的方法過程可有多種。