商品屬性：
組織來源 | 心臟組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X2699 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡介：
豬心臟瓣膜內(nèi)皮分離自心臟瓣膜組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟瓣膜在心停止的血液循環(huán)活動中扮演的角色即普通又關(guān)鍵：瓣膜相當(dāng)于門衛(wèi)，阻止血液回流于剛剛離開的心室。在心房與心室之間，在心室與離開心室的血管之間，都有瓣膜。血液流過后，瓣膜就會合上常見的瓣膜問題是二尖瓣脫垂，“二尖瓣”這個詞源自“主教冠”，它是主教戴的帽子，有兩個尖。位于左心房和左心室之間的瓣膜不能正常閉合。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟瓣膜內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬心臟瓣膜內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：
用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。
原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)”，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。
也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。
細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：
1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。
3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。
公司正在銷售的產(chǎn)品：
非凍型拭子DNA保存液（A型）
非凍型拭子DNA保存液（B型）
非凍型血液DNA保存液（100 mL）
非凍型血液DNA保存液（250 mL）
非凍型組織DNA保存液（100 mL）
紅細(xì)胞裂解液A型（核酸純化）
紅細(xì)胞裂解液B型（流式細(xì)胞分析用）
菌體內(nèi)毒素清除劑
土壤腐殖酸清除劑
一步離心式石蠟清除劑
動物DNA提取
96孔板血液DNAout(真空法)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
96孔板血液DNAout（離心法）（1次）
96孔板血液DNAout（離心法）（5次）
FTA血片DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern級動物DNAout
Southern級血液DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
百萬堿基級動物DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
百萬堿基級血液DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
TNFRSF4重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ESAM Protein Human 重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
豬心臟瓣膜內(nèi)皮細(xì)胞FAS (Apo-a1; CD95; 0.5mgFAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽) Protein
CD19 Protein Mouse 重組小鼠 CD19 / Leu-12 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CSTB重組人 Cystatin B / CSTB 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
