原代細胞VS細胞系：
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關)，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
商品屬性：
組織來源 | 顱骨組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X2705 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介：
豬成骨分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結構，構成面部的支架，共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質溶解礦物質，分泌蛋白酶消化骨基質，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細胞移行至被吸收部位，分泌骨基質，骨基質礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學基礎，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡介：
公司實驗室分離的豬成骨經(jīng)ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測：
公司實驗室分離的豬成骨采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機”而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機”，這時有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
公司正在銷售的產(chǎn)品：
小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human neural cell adhesion molecule ligand 1 (NCAM-L1/CD171) ELISA Kit 人神經(jīng)細胞粘附分子配體1(NCAM-L1/CD171)ELISA試劑盒
humanfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanaimousaibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物葡萄糖0酸變位酶(phosphoglucomase;PGM)電泳分析試劑盒5次
Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit人型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠白介素-17 英文名稱： ierleukin-17 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IL-17
小鼠白介素-18 英文名稱： ierleukin-18 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IL-18
小鼠白介素-23 英文名稱： ierleukin-23 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IL-23
小鼠白介素-27 英文名稱： ierleukin-27 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： IL-27
大鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒 ，英文名： D-LDH ELISA Kit
Mouse ierferon induced protein 10 (IP-10/CXCL10) ELISA Kit 小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒
ELISA 小鼠血管內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C) 48T/96T 進口分裝
CLIAKitforIAAELISAKit大鼠胰島素自身抗體規(guī)格：48T/96T
通用型微型RNA(miRNA)擴增試劑盒20次
ELISAKitAQP-1大鼠水通道蛋白1規(guī)格：48T/96T
ICAM3重組人 CD50 / ICAM-3 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
生長激素受體(GHR)重組蛋白 Recombinant Growth Hormone Receptor (GHR)
CD177重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (His 標簽)
HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
豬成骨細胞生長激素受體(GHR)重組蛋白 Recombinant Growth Hormone Receptor (GHR)
ERBB3 Protein Human 重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (His 標簽)
ICAM3重組人 CD50 / ICAM-3 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein Influenza B 重組乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)
CD177重組人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：
1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。
3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。
8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。
