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HMy2.CIR人B淋巴母細胞生物體

2016年03月15日 10:11:14人氣:159來源:上海弘順生物科技有限公司

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關 鍵 詞HMy2.CIR人B淋巴母細胞生物體
【資料簡介】

HMy2.CIR人B淋巴母細胞生物體接收后的操作流程與注意事項:
1、如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態,請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶繼續培養3天;同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基培養3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續脫落死亡,請及時實驗室技術人員會跟進解決
2、貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據該細胞生長密度,考慮*消化后,轉移到新的培養瓶繼續培養
3、生長不均:貼壁細胞若出現分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養基進行培養
細胞常規培養傳代流程HMy2.CIR人B淋巴母細胞生物體(請嚴格遵照無菌操作)
1、吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%*進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min)
2、鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉*,加6-8ml*培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3、取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
4、注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養,建議添加雙抗培養)
1、收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養基,如因特殊情況需要繼續使用原瓶,請在原瓶培養基中額外添加10%的血清,(原瓶培養基的繼續使用時間zui長不宜超過72小時)
2、貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養箱孵育到第二天再做消化傳代,請優先選擇直徑6cm的培養皿進行傳代培養
3、如簽收時出現培養瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
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