bEnd.3 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書

【資料簡(jiǎn)介】

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞T25瓶細(xì)胞處理方法

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí) 。并進(jìn)行以下操作：

1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2.肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（40×,100×,200×各一張）。

3.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫1-2小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

4.預(yù)熱培養(yǎng)基（含 10%胎牛血清，1%雙抗）。

5.若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的 5-6ml  培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以上，進(jìn)行傳代。

6.若細(xì)胞密度較大，達(dá)到 80%以上，將細(xì)胞傳到 10cm  培養(yǎng)皿培養(yǎng)。

7.傳代時(shí)，T25 瓶里保留部分細(xì)胞，同步培養(yǎng)，直到能確保 10cm  培養(yǎng)皿中的細(xì)胞狀態(tài)良好。