精子活力和頂體形態雙重熒光染色試劑盒產品說明書

【資料簡介】

主要用途

  精子活力和頂體形態雙重熒光染色試劑是一種旨在使用赫斯特33258和熒光素標記的花生凝集素雙重熒光染色技術，分析精子活力以及頂體狀態的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適用于各種動物或人體精子細胞以及凍存精子細胞的檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡便，性能穩定，熒光清晰。

技術背景

在男科學（Andrology）中，精子（spermatozoa）分析提供了精子生成（spermatogenesis）、精子壽命、以及生育能力的基礎信息。其中精子的活力（vitality）、運動能力（motility）、授精潛力（fertilizing potential）、膜結構或染色質結構完整性（integrity）、頂體反應（acrosomal reaction）功能的評價是精子分析的重要指標，也是決定人工受孕或體外授精（in vitro fertilization；IVF）的重要參數。其中頂體反應，是指當精子接近卵子實施授精時，精子頭部前半端的帽狀結構頂體，釋放出溶解酶，以便精子和卵子的膜融合。頂體反應測試是一項穩定的精子功能參數，可以用于預測受精成功率。因此頂體的結構完整性（intact）是評價的主要標志，也是不育癥和避孕藥物研究的對象。使用DNA敏感性熒光染料赫斯特33258（Hoechst 33258）和熒光素標記的花生凝集素（Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin；PNA-FITC）雙重熒光染色技術，是精子活力，以及精子頭部頂體狀態分析和授精效率評價的zui常用的方法。首先使用赫斯特33258染色，分析精子活力，基于赫斯特33258具有有限的膜通透性特點，受到活體精子細胞（包括游動性和非游動性精子）的排斥，而容易進入死亡精子細胞。其次使用熒光素標記的花生凝集素染料，與頂體外膜糖蛋白上的半乳糖殘基（β-D-galactosyl residue）的結合，顯示完整性（未反應性unreacted）頂體，同時可以應用于受精時的精卵反應。雙染的作用，以幫助區分生理性反應性頂體缺失（loss）或病理性退行性頂體缺失。通過常用的熒光顯微鏡（激發波長488nm，散發波長530nm）便可清晰觀察到綠色頂體狀態（status）。