流式細(xì)胞術(shù)

【資料簡(jiǎn)介】

　　流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）是一種對(duì)液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒（如微球，細(xì)菌，小型模式生物等）逐個(gè)進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù)。作為應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)平臺(tái)，現(xiàn)代流式細(xì)胞儀產(chǎn)生于上世紀(jì)六七十年代。經(jīng)過(guò)近四十年的發(fā)展和完善，今天的流式細(xì)胞儀已經(jīng)十分成熟，并被廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域，在各學(xué)科中發(fā)揮著重要的作用。
　　
　　流式細(xì)胞術(shù)-概述一種在液流系統(tǒng)中，快速測(cè)定單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞器的生物學(xué)性質(zhì)，并把特定的細(xì)胞或細(xì)胞器從群體中加以分類收集的技術(shù)。其特點(diǎn)是通過(guò)快速測(cè)定庫(kù)爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來(lái)定量測(cè)定細(xì)胞DNA含量、細(xì)胞體積、蛋白質(zhì)含量、酶活性、細(xì)胞膜受體和表面抗原等許多重要參數(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質(zhì)的細(xì)胞分開(kāi)，以獲得供生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究用的純細(xì)胞群體。目前zui高分選速度已達(dá)到每秒鐘3萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。現(xiàn)代綜合了流體力學(xué)技術(shù)、激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、熒光化學(xué)技術(shù)及單克隆抗體技術(shù)，是多學(xué)科多領(lǐng)域技術(shù)進(jìn)步的結(jié)晶。隨著現(xiàn)代科技的高速發(fā)展，為了滿足生命科學(xué)對(duì)細(xì)胞分析更高層次的要求，流式細(xì)胞技術(shù)仍然在快速發(fā)展，并已經(jīng)在檢測(cè)技術(shù)、分選技術(shù)及高通量分析等方面取得了許多突破。
　　
　　-簡(jiǎn)史1934年A.莫爾達(dá)萬(wàn)報(bào)道了使懸浮的紅細(xì)胞通過(guò)放置在顯微鏡載物臺(tái)上的玻璃毛細(xì)管的細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)方法。1956年W.H.庫(kù)爾特介紹一種利用細(xì)胞在導(dǎo)電溶液中,通過(guò)兩個(gè)小室間小孔（75～100微米）時(shí)的電阻變化（稱為庫(kù)爾特電阻）進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和測(cè)定細(xì)胞體積的裝置。1965年L.A.卡門茨基制成了多參數(shù)流式細(xì)胞計(jì)，可測(cè)定細(xì)胞大小和核酸含量。同年，M.J.富爾懷勒又制成細(xì)胞分選器。1969年范迪拉等應(yīng)用氬離子激光器和分層殼流技術(shù)，建立了一臺(tái)液流、照明光軸和檢測(cè)器軸互相正交的流式細(xì)胞計(jì)。以后，經(jīng)H.R.休利特等改進(jìn)了的細(xì)胞分選計(jì)，能使流動(dòng)液體內(nèi)的細(xì)胞噴射到空氣中進(jìn)行測(cè)量。但上述各系統(tǒng)中，所使用的激光光束以及設(shè)在收集熒光的檢測(cè)方向上的限制光欄都比液流中的細(xì)胞大，因而不能提供關(guān)于細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面的信息，故稱為零分辨率系統(tǒng)。隨后，L.L.惠利斯和S.F.帕滕發(fā)展了一種低分辨率的狹縫掃描技術(shù)，可以測(cè)定細(xì)胞核熒光、細(xì)胞和細(xì)胞核的大小。1969年，W.格德和W.迪特里希描述了使用汞燈做光源的流式細(xì)胞光度計(jì)，在落射光照明下，可激發(fā)在流動(dòng)室中與光軸平行流動(dòng)的細(xì)胞。-原理完整詳細(xì)資料在附件下載