48Ｔ基質金屬蛋白酶9人ELISA試劑盒說明書

【資料簡介】

基質金屬蛋白酶9 （MMP-9）人ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用 標本：血清或血漿

試驗原理：
MMP-9試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知MMP-9濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MMP-9和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌人ELISA試劑盒去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MMP-9的濃度呈比例關系。
人ELISA試劑盒自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
局限
6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y）人ELISA試劑盒相應的MMP-9標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的MMP-9含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍：0-800ng/ml
4、敏感度： 1.0 ng/ml

Y139695 辛基三嗪酮相關物質C標準品 20mg 乙基己基三嗪酮相關物質C
Y139696 氟替卡松丙酸酯相關物質混合物標準品 25mg NA 
Y139697 氟替卡松丙酸酯鼻噴劑分離度用混合物標準品 25mg NA 
Y139698 醋酸戈那瑞林雜質標準品 10mg NA 
Y139699 重組蛋白A標準品 ea NA 
Y139700 卡巴拉汀酒石酸鹽K-異構體 20mg NA 
Y139701 群勃龍醋酸酯系統適用性混合物 30mg NA 
Y139702 依諾肝素鈉溶液用于生物測定標準品 1ml NA
Y139703 胺碘酮相關物質E標準品 Amiodarone Related Compound E 25mg Amiodarone R...
Y139704 尼泊金甲酯標準品 Methylparaben  125mg 99-76-3 
Y139705 丙戊酸相關物質A標準品 0．25ml 99-67-2 
Y139706 水楊酸相關物質A標準品 100mg 9-96-7 
Y139707 丙戊酸標準品 Valproic Acid  500mg 99-66-1 
Y139708 昂丹司瓊雜質D標準品 30mg 99614-64-9 
Y139709 昂丹司瓊標準品 Ondansetron  300mg 99614-02-5 
Y139710 瑞格列奈相關物質B標準品 50mg 99469-99-5 
Y139711 鹽酸文拉法辛標準品 Venlaine Hydrochloride  100mg 99300-78-4 
Y139712 酒石酸唑吡坦標準品 Zolpidem Tartrate CIV 200mg 99294-93-6 
Y139713 堿式沒食子酸鉍標準品 Bismuth Subgallate （AS） 2g 99-26-3
Y139714 克拉霉素混合物R標準品 10mg 992-62-1
Y139715 紅霉素相關物質N標準品 50mg 992-62-1
Y139716 吡嗪酰胺標準品 Pyrazinamide  200mg 98-96-4 
Y139717 （-）-表沒食子兒茶素沒食子酸酯標準品 20mg 989-51-5
Y139718 煙酰胺標準品 Niacinamide （Vitamin B3） 500mg 98-92-0 
Y139719 異丙苯標準品 Cumene 1.2ml×3ampules 98-82-8
Y139720 甲酚曲唑三硅氧烷相關物質B標準品 25mg 98809-58-6
Y139721 醋酸倍他米松標準品 Betamethasone Acetate 500mg 987-24-6
Y139722 阿散酸標準品 Arsanilic Acid 25mg 98-50-0
Y139723 琥珀酸美托洛爾標準品 Metoprolol Succinate  200mg 98418-47-4 
Y139724 非那雄胺標準品 Finasteride  200mg 98319-26-7 
Y139725 馬來酸溴苯那敏標準品 Brompheniramine Maleate 125mg 980-71-2
Y139726 S-腺苷-L-高半胱氨酸標準品 S-Adenosyl-L-Homocysteine 50mg 979-92-0
Y139727 泮托拉唑相關物質C標準品 人ELISA試劑盒 20mg 97963-62-7 
Y139728 戊酸雌二醇標準品 Estradiol Valerate 100mg 979-32-8
Y139729 二硫化四乙基秋蘭姆標準品 Disulfiram 200mg 97-77-8
Y139730 螺內酯相關物質A標準品 100mg 976-71-6 
Y139731 尿囊素標準品 Allantoin 200mg 97-59-6
Y139732 芐星頭孢匹林標準品 Cephapirin Benzathine 100mg 97468-37-6
Y139733 蒼白松果菊標準品 1g 97281-15-7
Y139734 托吡酯標準品 Topiramate  150mg 97240-79-4 
Y139735人ELISA試劑盒 睪內酯酮標準品 Testolactone CIII 125mg 968-93-4