牛布魯氏菌（Brucellosis）Elisa試劑盒技術標準

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牛布魯氏菌（Brucellosis）操作步驟
1.   標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
80pg/ml  5 號標準品  150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液
40pg/ml  4 號標準品  150µl 的5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
20pg/ml  3 號標準品  150µl 的4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
10pg/ml  2 號標準品  150µl 的3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
5pg/ml  1 號標準品  150µl 的2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 
2.   加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10 µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3.   溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。      
4.   配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.   洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5 次，拍干。
6.   加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。  
7.   溫育：操作同 3。
8.   洗滌：操作同 5。
9.   顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.  終止：每孔加終止液50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.  測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。  測定應在加終止液后15 分鐘以內進行。

牛布魯氏菌（Brucellosis）保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 個月

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