96T人基質金屬蛋白酶-1ELISA檢測試劑盒內容及其配制

【資料簡介】

上海信然生物技術有限公司專業供應葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒，提供免費代測服務，保證實驗結果客觀真實性。我公司對試劑盒質量100%保證，若存在質量問題，我們無條件包退換

人基質金屬蛋白酶-1ELISA檢測試劑盒
試驗原理：
MMP-1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知MMP-1濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將MMP-1和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中MMP-1的濃度呈比例關系。

試劑盒內容及其配制
 
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人基質金屬蛋白酶-1ELISA檢測試劑盒
操作注意事項
1． 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7． 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備

 

人基質金屬蛋白酶-1ELISA檢測試劑盒
操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。
2． 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

建議使用的實驗方案

6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細胞因子反應。
3. 重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

人基質金屬蛋白酶-1ELISA檢測試劑盒
結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的MMP-1標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的MMP-1含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍：0-800ng/ml

4、敏感度： 1.0 ng/ml

Aminopyrine 氨基比林 [58-15-1] 100g
Aminosulfonic acid 氨基磺酸 [5329-14-6] 500g
2-Aminothiazole 2-氨基噻唑 [96-50-4] 100g
2-Aminothiazole 2-氨基噻唑 [96-50-4] 500g
Aminotriacetic acid 氨三乙酸 [139-13-9] 100g
Amlodipine besylate 苯磺酸氨氯地平 [111470-99-6] 25g
Ammonium acetate 乙酸銨 [631-61-8] 500g
Ammonium acetate 乙酸銨 [631-61-8] 500g
Ammonium acetate 乙酸銨 [631-61-8] 500g
Ammonium benzoate 苯甲酸銨 [1863-63-4] 250g
Ammonium biborate , trihydrate 硼酸銨三水 [12007-58-8] 250g
Ammonium bicarbonate 碳酸氫銨 [1066-33-7] 500g
Ammonium bismuth citrate, hydrate 檸檬酸鉍銨 [31886-41-6] 5g
Ammonium bisulfate 硫酸氫銨 [7803-63-6] 500g
Ammonium bromide 溴化銨 [12124-97-9] 250g
Ammonium carbonate and Ammonium carbamate mixture 碳酸銨 [506-87-6] 500g
Ammonium cerium （IV） nitrate 硝酸鈰銨 [16774-21-3] 25g
Amygdalin 苦杏仁苷 [29883-15-6] 5g
Bromothymol blue, free acid 溴百里酚藍 [76-59-5] 25g
Bromothymol blue, free acid 溴百里酚藍 [76-59-5] 50g
Chitin 幾丁質 [1398-61-4] 100g
Chlorogenic acid 綠原酸 [327-97-9] 1g
Chromotrope FB 酸性紅B [3567-69-9] 25g
Ammonium cerium （IV） sulfate 硫酸鈰銨 [10378-47-9] 25g

若需要了解試劑盒的詳細信息，請：地址：上海市莘浜路35弄1號501室
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：謝
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