簡單介紹細胞劃痕試驗

【資料簡介】

細胞劃痕法是簡捷測定細胞遷移運動和修復能力的方法，類似體外傷口愈合模型，在體外培養皿或平板培養的單層貼壁細胞上，用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央區域劃線，去除中央部分細胞，然后繼續培養細胞至試驗設定時間，觀察周邊細胞是否遷移至中央劃痕區，以此判斷細胞的生長遷移能力。試驗通常需設定對照組和供試品組，通過不同分組之間的細胞對于劃痕區修復能力的不同可以判斷供試品遷移與修復能力。

適用對象：包括加了某種處理因素、藥物、重組蛋白、外源性基因、生長因子等供試品。

試驗示例

1. 試驗材料

2. 試驗步驟

1）用marker筆比著直尺在6孔板背后每孔橫向和縱向各三等份劃線做記號，將細胞按照5×105cell/孔接種，加入10%CS的DMEM培養液培養24h，使形成單層細胞；

2）細胞培養結束后用10μL槍頭比著直尺對準孔板，輕推橫向、縱向劃線形成劃痕，用PBS漂洗細胞3次，去除劃掉的細胞；

3）在對照組和供試品組孔中分別加入2mL終濃度為0.5mg/mL的無血清培養基配制的人重組膠原蛋白和牛I型膠原蛋白，空白對照組只加入2mL無血清培養基；

4）轉移至37℃、5%CO2培養箱中，于0h、24h/48h、72h時，以橫向和縱向的交點為核心，在40倍顯微鏡下拍照；

5）每組3個重復孔，共27個數據；

3. 試驗結果