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雞c-myc癌基因產物酶聯免疫分析試劑盒說明書

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雞c-myc癌基因產物酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:96T
5pg/ml-480pg/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關液體樣本中c-myc癌基因產物(c-myc)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞c-myc癌基因產物(c-myc)水平。用純化的雞c-myc癌基因產物(c-myc)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入c-myc癌基因產物(c-myc),再與HRP標記的c-myc癌基因產物(c-myc)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的c-myc癌基因產物(c-myc)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞c-myc癌基因產物(c-myc)濃度。 
雞c-myc癌基因產物酶聯免疫分析試劑盒組成
標本要求 
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:雞c-myc癌基因產物酶聯免疫分析試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
0.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
.雞c-myc癌基因產物酶聯免疫分析試劑盒測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。

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