細胞污染的清除
培養細胞一經污染,多數較難處理。如果污染細胞價值不大,宜棄之;有細胞株留存的或可購置的,可在尋找原因后*消毒操作室,復蘇或重新購置細胞,再培養。若污染細胞價值較大,又難于重新得到,可采取以下辦法清除。
(一)使用抗生素
抗生素對殺滅細菌較有效。聯合用藥比單獨用藥效果好。預防用藥比污染后再用藥效果好。預防用藥一般用雙抗生素(00u/mL加00μg/mL),污染后清除用藥需采用大于常用量5~0倍的沖洗法,于加藥后作用24~48小時,再換常規培養液。此法在污染早期可能有效。所用抗生素品種除、外,還可用、、多粘菌素、四環素、等。常用400~800μg/mL或200μg/mL四環素處理,每隔2~3日換液次,傳~2代進行治療。近年來有報道,4-氟,2-羥基喹啉(Ciprofloxacin,Cip)、截耳素衍生物(Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-和四環素衍生物(BM-2)等三種抗生素單用或合用對殺滅支原體有效。這三種抗生素均用配成250X濃縮液,-20℃保存備用,使用濃度Cip為0μg/mL,BM-為0μg/mL,BM-2為5μg/mL。使用時先吸除污染的培養液,加入含BM-的RPMI640培養液,3天后再吸除培養液,加入含BM-2的RPMI640培養液,培養4天,如此連續3個輪次,直至用33258熒光染色鏡檢證明已清除支原體后,再加正常培養液培養傳代3-4次。