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細(xì)胞培養(yǎng)方法

時(shí)間：2016/8/26閱讀：752
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細(xì)胞培養(yǎng)方法
、獲取腦組織后,先仔細(xì)剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗～2次后,置于30～50倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即可制成細(xì)胞懸液,

2、為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5～0分鐘后,細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表層,吸除上清,如此反復(fù)二三次可獲得較多的細(xì)胞成分,

3、向末次沉淀物中加入適量營(yíng)養(yǎng)液,通過(guò)紗網(wǎng)或紗布濾過(guò),計(jì)數(shù)細(xì)胞并調(diào)整好細(xì)胞密度,接種入培養(yǎng)瓶或皿中,置5％CO2溫箱中培養(yǎng),

4、細(xì)胞生長(zhǎng)匯合后,可用0.25％消化法做傳代處理,加消化液的量以能覆蓋細(xì)胞層即可,待細(xì)胞開(kāi)始從瓶壁脫離（平均5～0分鐘）,加入含有血清培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液,

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