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傳代細胞內皮細胞-細胞凍存和復蘇實驗原理與注意事項

時間:2015/10/28閱讀:1355
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    按照常規的組織學分類方法,脊椎動物和人體細胞類型約有200余種。這些細胞在人體中呈現有序的空間分布。細胞是人體的結構和功能單位。共約有40萬--60萬億個,細胞的平均直徑在0--20微米之間。除成熟的紅血球外,所有細胞都有一個細胞核,是調節細胞作用的中心。zui大的是成熟的卵細胞,直徑在0.毫米以上;zui小的是血小板,直徑只有約2微米。而75000個精子細胞才抵得上一個卵細胞的重量。腸粘膜細胞的壽命為3天,肝細胞壽命為500天,而腦與骨髓里的神經細胞的壽命有幾十年,同人體壽命幾乎相等。血液中的白細胞有的只能活幾小時。

傳代細胞內皮細胞-細胞凍存和復蘇實驗原理:

    細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質能提高 細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少由于冰晶 形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法,這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化,避免 由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。

傳代細胞內皮細胞-細胞凍存和復蘇實驗注意事項:

. 從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存,但為對數生細胞。在凍存 前一天換一次培養液。

2. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免凍傷。

3. 凍存和復蘇用新配制的培養液。

傳代細胞內皮細胞-凍存和復蘇的原則:

    慢凍快融 當細胞冷到零度以下,可以產生以下 變化:細胞器脫水,細胞中可溶性物質濃度升高,并在細胞內形成冰晶。 如果緩慢冷凍,可使細胞逐步脫水 ,細胞內不致產生大的冰晶;相反,結晶就大,大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融,目 的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結晶。

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