雞卵黃蛋白原VTG試劑盒操作說明
本試劑盒僅供研究使用 標本:血清或者血漿
雞卵黃蛋白原VTG試劑組成
精密度微孔板96孔 | (Microtitration Strips) | 塊 | 2~8℃干燥保存 |
酶標偶合液 | (Conjugate ) | 瓶 2.0毫升 | 2~8℃冷藏保存 |
標準品 | (Standard) | 5瓶 各.0毫升 | 2~8℃冷藏保存 |
呈色劑A | (Substrate A) | 瓶 6.0毫升 | 2~8℃避光冷藏保存 |
呈色劑B | (Substrate B) | 瓶 6.0毫升 | 2~8℃避光冷藏保存 |
終止液 | (Stopping Solution) | 瓶 6.0毫升 | 室溫保存 |
20倍濃縮洗滌液 | (Rinsing Buffer x 20) | 瓶 60.0毫升 | 2~8℃冷藏保存 |
5倍濃縮樣品稀釋液 | (Diluent x 5) | 瓶 5.0ml | 2~8℃冷藏保存 |
英文說明書,中文說明書 |
| 各一份 | 室溫保存 |
注意事項
此雞卵黃蛋白原VTG試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育5分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育5分鐘
若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
實驗前準備
.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫用蒸餾水︰9倍稀釋后成為應用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照:00的體積比來稀釋樣品如0μl的樣品加入到ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
操作步驟
.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入00μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫用蒸餾水替代)
2、分別標記樣品編號,加入00μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
7、雞卵黃蛋白原VTG在標準品孔和樣品孔中加入00μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。
0、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
2、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
3、將酶標板置于37℃避光溫育反應5分鐘。
4、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
5、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,5分鐘內進行測定。
6、根據制備的標準曲線,計算樣本含量
結果判斷
. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、檢測值范圍:0-400pg/ml
3、敏感度:.0pg/ml