【用途】
豬藍耳病ELISA診斷試劑盒用于檢測豬血清中豬藍耳病病毒抗體。評估豬場豬藍耳病疫苗免疫狀況。豬藍耳病的流行病學調查。
【簡介】
豬藍耳病對豬影響的特征是引起豬嚴重的流產（早產，流產，弱胎，死胎）和呼吸道癥狀，引起流產是豬藍耳病的一個特征，而呼吸道癥狀也很嚴重，特別在育成豬上，它嚴重的影響了豬的生長（高投入低產出），造成巨大的經濟損失。
世界上許多地區還沒有地測定此病的感染率，許多國家估計高達80%。
此病的主要癥狀是繁殖障礙，引起早產、后期流產、弱仔、死產、胎兒木乃伊化、產仔率下降和發情期延遲等。這些癥狀可持續一到三個月。呼吸癥狀是此病的另一個顯著特征，大多數發生于低于3-4周齡的仔豬，但也可發生于生產周期的大多數階段。
血清學診斷技術是一項快速、特異的技術，可以直接檢測豬藍耳病病毒的抗體。
試劑盒由抗原包被的微孔板，酶標羊抗豬IgG及其它試劑制成，應用間接ELISA原理檢測豬血清中抗豬藍耳病病毒的抗體。
【原理】
本試劑盒是采用滅活過的豬藍耳病病毒抗原包被微孔板，在試驗中，按操作步驟加入對照血清和待檢血清，經溫育后，若樣品中含有豬藍耳病特異性抗體，則將與微孔板上抗原結合，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后；再加入酶標二抗，與微孔板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶結合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，加入HF溶液中止反應后，用酶標儀630nm波長測定各反應孔中的OD值。
【試劑盒主要成分】
1、 包被抗原的微孔板 2塊 （96孔）
2、 陰（綠蓋）、陽（紅蓋）性對照血清 各1管 （1ml/管）
3、 抗豬IgG-HRP結合物 （黃蓋） 1瓶 （22ml/瓶）
4、 20倍濃縮洗滌液（白蓋） 1瓶 （30ml/瓶）
5、 底物A（紫蓋）液、B液（黃蓋） 1瓶 （12ml/瓶）
6、 終止液（藍蓋） 1瓶 （12ml/瓶）
7、 樣品稀釋液 （透明蓋） 1瓶 （50ml/瓶）
【用前準備】
仔細閱讀說明書，所有試劑在4℃條件下保存，禁止結冰，如果干燥袋發紅不能使用，不用的孔必須密封好以防潮濕對平板有害，不要使平板接觸強光和氧化物。不要使用過期的成分或混合使用成分。注意加樣和沖洗，以確保試驗的度和準確度。操作過程中注意安全，要使用手套，終止液含有氫氟酸使用要小心。所有的廢液要經過處理和凈化。
本品為獸用產品。
【未提供的需用材料】
微量加樣器、加液槽、蒸餾水、恒溫箱、酶標儀、吸水紙
【注意事項】
1、 試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫。
2、 不同批號試劑盒的試劑組分不得混用。
3、 注意防止試劑盒各組分受污染。
4、 微孔板拆封后避免受潮或沾水（每次將剩余的微孔板用封口袋扎緊后盡快置于4℃）。
【試劑配制】
洗滌液：用蒸餾水稀釋20倍濃縮洗滌液，混勻。
【操作步驟】
1、 取預包被的微孔板（根據樣品多少，可拆開分次使用），用樣品稀釋液將待檢樣品40倍稀釋后加入板孔中，每孔加100μl。陰、陽性對照各設2孔，每孔100μl。另設一空白對照孔，空白對照孔加100μl稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30min。
2、 甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗板3次，300μl/孔，每次靜置3分鐘倒掉，zui后一次在不掉屑干凈吸水紙上拍干。
3、 每孔加酶標二抗（抗豬IgG-HRP結合物）100μl，置37℃溫育30min。
4、 洗滌3次, 方法同2。
5、 每孔加底物A液、B液各1滴（50μl），混勻，室溫（20-25℃）避光顯色10min。
6、 每孔加終止液1滴（50μl），10分鐘內測定結果。
【結果判定】
以空白孔調零，在酶標儀上測各孔OD630值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD630值大于或等于0.4，陰性對照孔平均OD630值必須小于0.2。
樣品OD630值大于0.4，判為陽性；樣品OD630值在0.2到0.4之間，判為可疑；樣品OD630值小于0.2，判為陰性。
【規 格】 96孔×2塊
【有 效 期】 6個月
【貯 存】 2-8℃避光保存
【生產日期】 見試劑盒外包裝
提示：酶標板真空包裝袋若有漏氣，酶標板仍然正常有效，不影響實驗結果，請放心使用。
