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產品簡介
產品中文名：Helixyte 綠色雙鏈DNA定量檢測試劑盒
產品英文名：Portelite™ Fluorimetric DNA Quantitation Kit
產品貨號：17665
產品規格：100 Tests
產品概述
在進行各種分析的DNA樣品制備中，DNA定量是一項非常重要的任務。 Portelite 熒光DNA定量試劑盒提供了使用Qubit熒光儀操作Helixyte Green BR快速定量dsDNA的方法。它針對Cytocite 和Qubit 熒光儀進行了優化。 Portelite 熒光DNA定量測定在三個數量級上呈線性。該測定法對RNA上的雙鏈DNA（dsDNA）具有高度選擇性，并針對測量10 pg / µL至10 ng / µL的dsDNA濃度進行了優化。Helixyte Green-BR與dsDNA結合后表現出較大的熒光增強，并且比UV吸光度讀數高幾個數量級。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優質的Helixyte 綠色雙鏈DNA定量檢測試劑盒。
適用儀器
| 量子位熒光計 |
|
| Ex: | 480 nm |
| Em： | 530 nm |
| 規格: | 0.2 mL PCR 小瓶 |
| CytoCite 熒光計 |
|
| Ex: | 480 nm |
| Em： | 530 nm |
| 規格: | 0.2 mL PCR小瓶 |
實驗方案
樣品實驗方案
簡要概述
1.準備Helixyte Green BR工作溶液
2.在每個0.2 mL PCR管中加入190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液
3.在每個試管中添加10 uL DNA標準溶液或測試樣品
4.在室溫下孵育2分鐘
5.使用CytoCite 熒光儀或Qubit 檢測熒光
注意：打開之前，請將所有成分置于室溫下。
溶液配制
工作溶液配制
Helixyte Green-BR工作溶液：在DNA分析緩沖液（組分B）中稀釋200倍Portelite dsDNA試劑（組分A）。 例如，要為8個樣品準備足夠的工作溶液，請將5uL Helixyte Green BR（組分A）添加到1mL DNA分析緩沖液（組分B）中。注意：通過用箔紙覆蓋或將其置于黑暗中來保護工作液免受光照。 我們建議在塑料容器中操作而不是玻璃中制備該溶液，因為染料可能會吸附到玻璃表面。 為了獲得佳結果，應在準備后的幾個小時內使用此溶液。
實驗步驟
根據DNA樣品的估計濃度，樣品量可以在1?20 uL的范圍內。推薦的樣品量為10 uL，DNA濃度在0.2?100 ng / uL范圍內。如果使用其他樣品體積，請在濃度計算中調整稀釋倍數。
10 uL樣品體積（DNA濃度在0.2?100 ng / uL范圍內）實驗方案。
1.在每個Cytocite 樣品管（＃CCT100）或等效的0.2 mL PCR管中添加190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液。注意：請使用薄壁聚丙烯透明0.2 mL PCR管，例如＃CCT100。
2.向每個試管中加入10 µL DNA標準品或測試樣品，然后離心2?3秒進行混合。
3.將所有試管在室溫下孵育2分鐘。
4.將樣品插入CytoCite 或Quibit 中，并通過綠色熒光通道檢測熒光。若使用CytoCite，請遵循適用于CytoCite 熒光儀的程序。
標準校準曲線的準備
對于Portelite 分析，您可以選擇使用DNA標準液繪制校正曲線。
1.在DNA分析緩沖液（成分B）中，用100 ng/uL的DNA標準BR#2（成分D）進行1/3系列稀釋，得到30、10、3、1、0.3、0.1和0 ng/uL的DNA標準稀釋液。
2.在每個試管中加入190 uL Helixyte Green BR工作溶液。
3.將10 uL標準液或10 uL樣品添加到0.2 mL PCR管中。
4.將反應在室溫下孵育2分鐘。
5.將樣品插入CytoCite ，并通過綠色熒光通道檢測熒光。
圖示
圖1.使用具有寬動態范圍的Portelite 熒光DNA定量試劑盒生成的DNA標準曲線。 使用綠色熒光通道定量熒光強度，使用線性擬合計算回歸模型。
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