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百螢課堂:CCK-8試劑盒相關問題與解答二

時間:2023/6/28閱讀:62
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13.在實驗中OD值太高,怎么解決?

答:可以縮短加入CCK-8后的培養時間。例如:可以把加入CCK-8試劑后的培養時間由2小時縮短為1小時。此外,可適當減少細胞的數量。

 

14.如果OD值太低,怎么解決?

答:可以采取2個辦法:1、適當增加細胞數量  2、延長加入CCK-8試劑后的反應時間。

 

15.應該每次做標準曲線嗎?

答:建議每次做。雖然細胞是一樣的,但是細胞的狀態不一定一樣。對于狀態不一樣的細胞,建議每次做標準曲線。

 

16.cck-8顯色過程中,如何終止反應

:有以下幾種方法(96孔板):

(1) 在顯色反應后,將培養板放置4°冰箱內;

(2) 每孔加入10ul 0.1M HCL溶液。

(3) 每孔加入10ul 1%(w/v)的SDS溶液。注:反應停止后,應在24h內測定

 

17.如何減少由于CCK-8試劑在孔壁上的殘留所帶來的誤差

答:可以在加樣前用培養基稀釋CCK-8試劑并混勻后加樣

 

18.好用的 CCK-8 試劑盒推薦?

:百螢生物生產的 Cell Counting Kit-8(CCK-8)細胞活力檢測試劑盒已廣泛用于生物活性因子的活性檢測,抗腫瘤藥物的篩選,細胞增殖的測定,細胞毒性檢測以及藥敏等與細胞活性和增殖相關的實驗

19.如何使用CCK-8進行細胞增殖實驗?

答:通常,使用CCK-8進行細胞增殖實驗的步驟如下:

1)將需要測定增殖能力的細胞均勻懸浮在培養基中,并將其分配到孔板或培養皿中。

2)在每個孔中加入CCK-8試劑,并確保試劑均勻分布。

3)將孔板或培養皿放回培養箱中,進行一定時間的培養,使細胞與試劑發生反應。

4)反應結束后,使用吸光度計測量吸光度,并根據標準曲線或控制組進行數據分析,得出細胞增殖能力的相對值。

 

20.CCK-8試劑盒的優點是什么?

答:1)高靈敏度:CCK-8試劑可以對低細胞數進行檢測,因此對于罕見細胞或稀釋的細胞樣品非常有用。

2)快速操作:CCK-8試劑盒提供了一種快速而簡便的方法來評估細胞的增殖情況,通常只需幾個小時即可得到結果。

3)可行性高:CCK-8試劑盒對各種細胞類型都具有較好的適用性,可應用于多種細胞培養條件和實驗設計。

 

 

21.有沒有CCK-8及與其他細胞增殖檢測試劑的特性對比?

答:圖中提供了多種用于檢測細胞增殖的方法、對比,供參考

 

22.CCK-8試劑盒是否有副作用?

答:CCK-8試劑盒是一種常用的細胞增殖檢測試劑,通常在細胞培養實驗中使用,并且已被廣泛驗證和接受。一般情況下,正確使用CCK-8試劑盒不會對細胞產生明顯的副作用。CCK-8試劑本身對細胞具有較低的毒性。它是一種水溶性試劑,主要由WST-8(水溶性四氧化三氮唑鹽)和電子媒介體1-Methoxy PMS(促進電子傳遞)組成。

CCK-8試劑中,WST-8可被細胞內的代謝活性還原為橙色的水溶性產物,該產物在細胞外可通過光學密度測量進行定量檢測。1-Methoxy PMS作為電子媒介體,促進WST-8的還原反應。

CCK-8試劑與細胞接觸時,其影響對細胞的影響主要來自WST-8的還原產物。在適當的濃度下,CCK-8試劑對細胞的生長和代謝活性影響較小,并不會對細胞造成明顯的毒性。

然而,值得注意的是,對于特定的細胞類型或實驗條件,可能需要根據實際情況進行優化和驗證。此外,在使用CCK-8試劑時,建議遵循相關的操作規程和安全指南,確保安全操作和正確解讀實驗結果。

23.CCK-8在實驗時,每孔應該接種多少細胞?

答:針對標準96孔板,貼壁細胞的最小接種量為1000個/孔 (100μl培養基)。若為白細胞,接種量不低于2500個/孔 (100μl培養基)。如若使用24孔板或6孔板,應預先計算每孔相應的接種量,并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK-8溶液。

 

以上是百螢整理的CCK-8試劑盒的問題以及解答,大家可以做為參考。


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