當前位置:南京沃博生物科技有限公司>>技術文章>>Abmart抗體使用及保存說明書
1.打開產品包裹
(1) 在打開包裹之前先確定其是否完整,如果包裹的外包裝完好,請拍照記錄。然后檢查包裹內部的物品是否也完整。
(2) 如果收到的抗體產品是液態的,請檢查該產品在接收時是否處于低溫環境(低于10度)。
(3) 抗體產品發貨時,您會收到一封來自我們的發貨通知及裝箱單信息的郵件,您也可以通過登錄我們的客戶中心網站來找到裝箱單信息。請核對收到的抗體產品的管數、樣品名稱、質量、體積和濃度是否與裝箱單上的信息一致。
(4)標簽詳解:
(5) 如您對以上步驟有所疑問,請聯系我們的客服人員
2. 腹水及抗體復溶
(1) 您可以根據需要將腹水及抗體干粉儲存于-20℃,直至使用時再取出。如果同一個樣品有多管,建議根據所需用量進行再溶,然后將剩余的干粉儲存在-20℃。
(2) 腹水和抗體保存液成分如下表所示:
單抗腹水 | 0.05% Proclin 300,50% 甘油(液體)/10 mM PBS(凍干) |
純化單抗 | 100mMganansuan , 1Mtris中和 , pH 7.4 |
多抗 | 100mMganansuan , 1Mtris中 和 , 0.05% Proclin 300, 50% 甘油 , pH7.4 |
(3) 進行抗體復溶時,請根據試管上標注的質量向管內加入適量的Milli-Q water。
(例如,對于0.2 mg的抗體,如果加入200 μL Milli-Q water溶解,即為濃度1 mg/ml的工作液。工作液儲存請參照說明書第四部分,抗體稀釋請參照說明書第五部分)。
加入Milli-Q water后,輕柔顛倒混勻。如果仍有部分抗體未溶解,可以將試管于4℃冰箱中靜置4個小時,其間每小時輕柔混勻一次。
(4) 如果您的樣品經過上述步驟未wanquan溶解,建議添加等量10 mM PBS pH 7.4溶液,然后將樣品于4℃冰箱中靜置4個小時,其間每小時輕柔混勻一次。
(5) 對于部分可溶的樣品,您可以在4℃,10,000 rpm的條件下離心1 min。然后收集上清,采用我們為您提供的多肽進行ELISA檢測該上清。
(6) 如果未檢測到上清液的活性,請聯系我們的客服人員
備注:如果您收到的腹水或者抗體為液態的,建議您根據每次實驗需要的用量進行小體積分裝,分裝后儲存到-20℃以便于短期使用。需要長期使用時,請參照本說明書第四部分的建議來進行儲存。
3. 多肽的復溶
(1) 您可以根據您的需要將多肽干粉先儲存于-20℃冰箱,直至使用時再取出。
(2) 向干粉中加入50 μL DMSO制成高濃度的儲備液。比如,1 mg的干粉可以形成濃度為20 mg/mL的儲備液。儲備液儲存于-20℃條件下。
(3) 每次實驗,取出足夠的儲備液,利用10 mM PBS pH7.4溶液將其稀釋成工作液(例如,4 mg/mL的工作濃度)。請盡量避免將稀釋后的樣品在4℃放置時間超過一周,以防造成抗體活性降低。
4. 儲存
請避免反復凍融對抗體產品造成的傷害,建議您將初次復溶后的抗體跟據使用量進行小量分裝(可以等量分裝到小體積的EP管中,每次使用取出1管進行稀釋即可),或者添加50%終濃度的甘油,并且儲存在-20℃冰箱。如您需要將復溶后的腹水在4℃條件下短期儲存,建議加入抗微生物試劑(azide or thimerosal),但不建議在4℃儲存較長時間。
備注:多抗產品是一次性發貨,并且為含有終濃度50%甘油的液態抗體。
5. 抗體驗證
(1) 稀釋建議:抗體使用的最適濃度或者最適稀釋比例請您根據實驗類型調整。
我們推薦的稀釋濃度為:WB: 1:200-1:1000 IP: ≥1:200 IF/IHC: ≥1:400
(2) 在用于其他實驗驗證之前,我們推薦您先采用Western Blot(WB)實驗方法來進行抗體的檢測。WB結果是抗體特異性驗證的必須部分。詳細的抗體驗證方法您可以通過我們的客戶中心網站獲得。
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