分光光度計日常分析工作中,經(jīng)常遇到的問題是同一個樣品在不同儀器上得到的吸收測量值不相同,有時,它們之間的差別往往超過允許公差范圍,增加了生產(chǎn)部門和檢驗部門的矛盾。為此,要得到精確的測量結(jié)果,就必須充分了解儀器的主要參數(shù)對吸收測量的影響。影響測量結(jié)果的主要參數(shù)有波長精度、雜散光、噪聲、基線平直度以及光譜帶寬，下面一一進行介紹。
1、波長準確度
波長準確度在確保紫外可見分光光度計的準確度中起著十分重要的作用。因為測試樣品物質(zhì)不同，那么它對不同波長的光有著不同的摩爾吸光系數(shù)。由朗伯比爾定律可知，不同的摩爾吸光系數(shù)所對應(yīng)的吸光度會有差異，由此就會產(chǎn)生不一致的分析誤差。
2、雜散光
雜散光是準確度分析誤差的一個重要來源，直接影響著樣品物質(zhì)在測試時所能配制的zui大濃度。有研究結(jié)果表明，越高濃度的測試樣品雜散光的影響越大，如果是在一個比較大的濃度下，雜散光增強，吸光度和濃度成比例的范圍縮小。
3、噪聲
影響紫外可見分光光度計光度準確度的噪聲包括光噪聲和電噪聲。其中光噪聲是由光源產(chǎn)生的，具體來說就是光源的發(fā)光強度分布因子導(dǎo)致光噪聲的出現(xiàn)。電噪聲的來源是光電倍增管、各種電源以及放大器等。作為紫外可見分光光度計光度準確度zui關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù)之一，噪聲是分析測試中主要誤差源頭，它是影響紫外可見分光光度計光度準確度檢測下限的因素。
4、基線平直度
基線平直度是全波段內(nèi)每個波長上的噪聲體現(xiàn)，基線平直度直接影響紫外可見分光光度計光度準確度的靈敏度以及影響檢測下限或使用范圍，是紫外可見分光光度計中一個十分重要的技術(shù)參數(shù)。購買者和使用者在選購和使用紫外可見分光光度計的時候，對基線平直度會有這特別的重視程度，會作為選購和使用的重要技術(shù)指標。但是相對于其他影響紫外可見分光光度計光度準確度的因素來說，基線平直度是受到目前國內(nèi)外研究工作者重視程度遠遠不夠的技術(shù)指標。
5、光譜帶寬
光譜帶寬是影響紫外可見分光光度計光度準確度的一個十分重要的因素。當光譜帶寬不同時，測試得到的數(shù)據(jù)就會不同，因而不同光譜帶寬下的分析誤差也大相徑庭。
分光光度計誤差計算方式
分光光度計的分析總誤差為雜散光引起的誤差和噪聲引起的誤差之和。紫外分光光度計分析測試的總誤差除了包括雜散光和噪聲（含基線平直度）引起的誤差，還有光譜帶寬、波長準確度、試樣配制和操作等引起的誤差。因此，總誤差應(yīng)是雜散光、噪聲、基線平直度、光譜帶寬、波長準確度、試樣配制和操作等多種誤差的總和。
以上誤差計算方法簡單、直觀，儀器設(shè)計者或分析工作者只要根據(jù)自己估算或?qū)嶋H測試的數(shù)據(jù)（或假設(shè)的數(shù)據(jù)），結(jié)合紫外分光光度計的性能技術(shù)指標（雜散光、噪聲、基線平直度、芳寬等），并考慮分析測試者在樣品配制、處理、儀器操作等方面的誤差，就能估算出儀器對某項分析工作的分析誤差，是一種很實用的誤差計算方法。
