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南京億迅生物科技有限公司
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ATP含量檢測試劑盒 產品介紹
2024-5-22 閱讀(287)
產品名稱：ATP含量檢測試劑盒
貨號：YX09117
規格：50T/48S
儲存條件：具體以標簽為準
有效期：6個月
檢測意義：
三磷酸腺苷(adenosine 5-triphosphate,ATP)是生物體內能量轉換最基本的載體,其含量的變化直接關系到各器官的能量代謝。ATP 作為最重要的能量分子在細胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP 水平的改變,會影響許多細胞的功能。通常細胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態下,ATP 水平會下降,而高葡萄糖刺激等對于一些細胞可以上調細胞內 ATP 水平。通常 ATP 水平的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細胞凋亡時 ATP 水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發生狀態。 ATP 含量測定試劑盒可以用于檢測紅細胞或組織內的 ATP 水平。
測定原理: 肌酸激酶催化三磷酸腺苷和肌酸,生成磷酸肌酸,用磷鉬酸比色法進行檢測
樣本前處理:
1、紅細胞:抗凝全血取下層壓積紅細胞,一般按 1:4 的體積比加雙蒸水進行稀釋,再 混勻使溶血完全,制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮 10 分 鐘,取出混勻抽提 1 分鐘,4000 轉/分鐘離心 10 分鐘,取上清液待測。
2、組織樣本:準確稱取組織稱重,按重量(g):體積(mL)=1：9 的比例,加入 9 倍體積的沸雙蒸水,制成 10%的勻漿液,再置于沸水浴中煮 10 分鐘,取出混勻抽提 1 分鐘,3500 轉/分離心 10 分鐘,取上清液待測。
3、培養細胞:先離心處理將細胞與培養上清分離,除去培養上清,得到下層沉淀細胞 (一般細胞數量達到 106),將收集好的細胞加入 300～500uL 熱雙蒸水,置于熱水浴 (90-100℃)中勻漿破碎,后將細胞懸液于沸水浴中加熱 10 分鐘,取出混勻抽提 1 分鐘,即可用于測定(如果存在大塊細胞碎片,需離心后取上清測定)。
注:混勻抽提 1 分鐘即為漩渦混勻 1 分鐘。
注意事項:
1、此法具有微量、靈敏、快速的特點。對測定所用試管要求嚴格,要求不能有任何磷污染,建議使用全新一次性塑料試管,避免磷污染是檢測成敗的關鍵;
2、顯色應用液配好后,不可放置太久,一般可保存五天,最好現用現配。隨時放冰箱 。
3、組織勻漿宜用 2%~5%濃度的勻漿上清,若樣本濃度過高,則底色過深(對照管 OD 過 高)需稀釋后再進行測定;一般通過做預試驗將對照 OD 值控制在 1.0 以下
4、為了您的安全與健康，實驗時請穿戴防護服并佩戴一次性手套。
5、本產品僅供科研實驗用，不做其他用途。
