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快速限制性內切酶質量控制

2023-5-5  閱讀(351)

快速限制性內切酶質量控制


產品描述

FuniCut™系列內切酶是通過基因工程重組技術,可在5~15 min內精確完成DNA切割的快速限制性內切酶,適用于快速切割質粒DNA、PCR產物、基因組DNA等。FuniCut™系列快速內切酶共用一種酶切緩沖液,從而簡化了酶切反應體系,另外,有良好的酶活冗余度,可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。


識別位置

5'-↓GATC-3'

3'-CTAG↑-5'


推薦反應條件

1× FuniCut™ 緩沖液;

最適37°C孵育。


失活條件

80°C孵育20 min。


注意事項

1)3 h孵育未表現星號活性,延時酶切可能出現星號活性;

2)受Dam甲基化影響,序列完-全重疊,剪切阻斷;

3)受EcoBI甲基化影響,序列可能重疊,剪切阻斷;

4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作;

5)本產品僅作科研用途!


質量控制

1. 功能活性檢測:最適反應溫度下,在20 μL反應體系中,1 μL酶能夠在15 min內完-全消化1 μg λDNA (Dam-)。

2. 超長時間孵育檢測:最適反應溫度下,將1 μL酶與1 μg λDNA (Dam-)共孵育3 h,未檢測到其他核酸酶污染或星號活性引起的底物非特異性降解,但延長孵育時間可能出現星號活性。

3. 酶切-連接-再酶切檢測:最適反應溫度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切產物,在22°C下使用適量T4 DNA連接酶可以將酶切產物重新連接,將連接產物再次回收后,使用相同的內切酶可以重新切開連接產物。

4. 非特異性內切酶活性檢測:最適反應溫度下,將1 μL酶與1 μg超螺旋質粒DNA共同孵育4 h后,使用瓊脂糖凝膠電泳檢測,質粒DNA仍然處于超螺旋狀態。




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