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凍干粉標準菌株使用教程
2022-11-30 閱讀(2478)
凍干粉標準菌株使用教程
“標準菌株:由國內或國際菌種保藏機構保藏的,遺傳學特性得到確認和保證并可追溯的菌株[1]。標準菌株是在給某細菌定名、分類記載和發表時,為了使定名準確和作為分類概念的準則,以純粹活菌(可繁殖)狀態所保存的菌種。 標準菌株也稱為模式菌株(type strains),通常需要由至少兩個不同國家的專門保藏機構保藏的菌株,一個菌株在同一個保藏機構有且僅有永-久保藏號
【冷凍管開封】
用浸過75%酒精的脫脂棉嚴格消毒冷凍管蓋。
【菌株復溶】
無菌環境中旋開裝有復溶液的滴瓶蓋，吸取1ml 左右復溶液，加入到冷凍管中。輕輕振蕩，使凍干菌
株溶解呈懸浮狀。
【菌株復壯】
用無菌吸管吸取菌懸液，轉移到復溶液滴瓶中。做好標識，在適宜溫度下培養。細菌在30-35℃培養
箱中培養24-48h，真菌在20-25℃培養箱中培養24-72h（必要時，可適當延長培養時間）。
【菌株傳代】
將得到的菌株的新鮮培養物轉接到適宜的固體培養基及液體培養基中（盡量增大接種量：如用無菌吸
管吸取≥50μl 新鮮培養物至固體培養基，邊移動邊緩慢釋放），適宜溫度下培養，用以菌株的保藏、傳
代及制備工作菌株。
【注意事項】
1、菌種活化前，將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環境中，長時間室溫下放置會導致菌種衰退；
2、冷凍管開封、凍干粉復溶、菌株恢復培養等操作應在無菌條件下進行；
3、一些菌種經過冷凍干燥保存后，延遲期較長，部分需連續兩次繼代培養才能正常生長；
4、苛養菌的培養需采用含特定營養成分的培養基，敬請正確選擇，不清楚時來電詢問；
5、某些厭氧菌的培養，自開封到接種完成，均需以無氧氣體充填，以保持厭氧狀態；培養過程中亦要保
持厭氧狀態；
6、某些菌種，如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2 促進生長；
7、如發現冷凍管蓋松動、復溶液渾濁等異常情況，應停止使用對應產品。
8、部分菌種有致病性、擴散性，請專業人員在專業環境下有保護性操作。
【保藏條件】-20℃保存（復溶液于2-25℃保存）
【保藏時間】24 個月，應根據菌種狀況及時轉接
