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小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009操作流程

2019-12-18  閱讀(182)

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【詳細說明】

             小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009操作流程

   在這樣一個溫馨祥和的夜晚,圣誕老人正藏在外面青青的圣誕樹下竊笑,睡吧!我親愛的寶貝兒,明天早上醒來的時候,你將收到心愛的禮物,包括我!接焉為介紹 小鼠正常食管上皮細胞;MNEEC/HL-009操作流程.

細胞特性

1)細胞來源于人胎盤組織。

2)細胞鑒定:血小板-內皮細胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養。

操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量,使的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。

2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。



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