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上皮細胞株常見問題解析
2018-9-18 閱讀(236)
| 提 供 商 | 上海邦景實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 165.3KB |
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| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 30次 | |
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上皮細胞株常見問題解析
一、為什么培養(yǎng)基中可以省去酚紅？
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑，研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素），為避免固醇類反應(yīng)，用無酚紅培養(yǎng)基。
二、在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，有效期是多長？
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
三、如何選用培養(yǎng)基?
選擇培養(yǎng)基沒有一定標準，有幾點建議可供參考：
建立某種細胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細胞的培養(yǎng)基?？梢圆殚單墨I，或在購買細胞株時咨詢。
本單位慣用的培養(yǎng)基不妨一試，許多培養(yǎng)基可以適合多種細胞。
根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養(yǎng)基。如小鼠細胞株多選1640；進行細胞雜交、基因轉(zhuǎn)移實驗，可選擇IMDM。
用多種培養(yǎng)基培養(yǎng)目的細胞，觀察其生長狀態(tài)，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據(jù)實驗結(jié)果選擇*培養(yǎng)基，這是zui客觀的方法，但比較繁瑣。
四、選擇便宜的培養(yǎng)基品種成本就低嗎？
通常，培養(yǎng)基可以適合多種細胞，細胞也可以在不同培養(yǎng)液中生長；例如在MEM中培養(yǎng)的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。
培養(yǎng)基養(yǎng)份不同會導(dǎo)致細胞生果不同，病毒或蛋白表達不同，應(yīng)該選擇效果的培養(yǎng)基，考慮生物制品的綜合成本；
zui終目的是追求生物制品的得率——得率高則成本低。
五、細胞生長質(zhì)量很好，為什么病毒、蛋白表達量沒有提高？
細胞生長質(zhì)量高是高表達的必要條件。
采用細胞的疫苗是體外培養(yǎng)一定量的動物細胞并接種病毒，利用病毒在細胞內(nèi)增殖，得到預(yù)期的病毒抗原，然后制成疫苗。細胞生長質(zhì)量包括細胞密度和形態(tài)，沒有好的細胞生長質(zhì)量就不可能有高的表達量。
但要注意的是，細胞生長質(zhì)量好、密度厚度大時候病毒接種量也應(yīng)該相應(yīng)增大，表達量才會提高，否則前期的高質(zhì)量細胞培養(yǎng)就可能浪費了。
同時病毒、蛋白的表達、分泌在一定濃度下可能會飽和，因此如欲獲得高表達，還須研究合適的收液時間和次數(shù)。
