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血清不穩定原因及主要作用
2022-11-14 閱讀(179)
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些yi血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。血清最大的劣勢就是不穩定,不穩定原因主要如下:
1、來源不穩定。以胎牛血清為例,懷孕母牛在屠宰前腹部被剖開,取出胎牛,在低溫無菌條件下,刺破胎牛的心臟以獲取血清。就這一條,動物倫理組織就可以把你攔住嘮嘮。另外,牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家,我國在對牛血清的質量《中國生物制品主要原輔料質控標準 2000》中提出比較嚴格的標準要求,包括蛋白質含量,細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素,細胞增殖支持等檢查。
2、組分不穩定。還有最讓人鬧心的,動物血清成分復雜,其組分及含量常和動物性別(公胎牛,母胎牛,如激素)、年齡、生理狀態、營養條件不同而有差異,是不是覺得特像中藥。還有,盡管血清大部分成分是已知的,但仍然存在不清楚的組分,所以導致標準化極其困難。所以,師兄師姐經常會告訴你說,不同的血清差異很大,就是同一的不同批次血清差異也很大。
3、用法不穩定。實驗習慣的不同,都可能導致細胞實驗結果的不穩定,比如,有人四度過夜融化,有人急性子,直接扔進水浴鍋。新手拿到一瓶血清,第一個問題就是問自己,要不要滅活?百du了一下答案,嚓,還是中藥,說啥的都有。還有,別忘了,血清同時含有內毒素、血色素、補體、抗體等其他有害成分,影響細胞生長甚至導致細胞死亡,對某些實驗來說,極為重要。
在細胞培養中的作用主要有以下幾點:
1. 提供對維持細胞指數生長的激素,特別是基礎培養基中沒有或量很少的營養物,還包括一些主要的低分子營養物;
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力;
3. 血清中含有一些微量元素,有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用;
4. 細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源;
5. 血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養攪拌時,粘度起到重要作用;
6. 抑制蛋白酶的作用,在貼壁細胞傳代時可將剩余yi蛋白酶失活,從而保護細胞。