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上海邦景實業(yè)有限公司
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細胞培養(yǎng)過程中pH值下降解決方法
2022-8-15 閱讀(311)
大多數(shù)細胞適宜的pH為7.0~7.4，偏離此范圍可能對細胞生長產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不*相同，原代培養(yǎng)的細胞一般對pH變動耐受力差，無限細胞系耐受力強。細胞培養(yǎng)過程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細胞生長非常快時，pH值通常下降得很快，此時可以通過及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得過緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細菌、酵母或真菌污染等也能導致pH值通常下降得很快。這時，可以通過以下幾種方法解決：
1、增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在2.0 g/L到3.7 g/L之間時對應(yīng)的CO2濃度為5~10%；
2、 改用不依賴CO2培養(yǎng)液；
3、 適當松開瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液，使終濃度為10~25 mM；
4、在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle's鹽配制的培養(yǎng)液，在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks'鹽配制的培養(yǎng)液；
5、 如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
