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大鼠肺成纖維樣細胞;RL1生長特性注意事項

2021-7-13  閱讀(256)

大鼠肺成纖維樣細胞;RL1復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
/蛋白激酶ATR抗體
去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
活化轉錄因子6抗體
銜接蛋白β抗體
銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體
水通道蛋白-9抗體
膜粘連蛋白A3抗體
膜粘連蛋白 A4抗體
自噬相關蛋白8A抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體
蛋白激酶錨定蛋白13抗體
AP-1μ2抗體
肥大細胞膜抑制性受體Allergin1抗體
腦鈉通道蛋白1抗體
肌動蛋白相關蛋白2/3復合亞單位B1抗體
三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體
甲胎蛋白抗體
毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體
ATP結合盒轉運蛋白2抗體

 



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