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真菌1-3-β-D葡聚糖(1,3-β-DG)試劑盒操作步驟

2020-4-29  閱讀(276)

真菌1-3-β-D葡聚糖(1,3-β-DG)試劑盒操作步驟:
1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.  樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值

備注:
1.  標準品濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5 ng/ml
2.  經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 



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