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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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小鼠elisa試劑盒分光光度計(jì)定量測(cè)定操作
2018-7-5 閱讀(340)
在運(yùn)用小鼠elisa試劑盒方法測(cè)定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經(jīng)洗滌,加入含有被測(cè)抗體之標(biāo)本,再經(jīng)孵育洗滌后,加入酶標(biāo)記抗抗體,(對(duì)人的標(biāo)本來(lái)說(shuō)即加酶標(biāo)抗人球蛋白IgG、IgM),再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色,底物降解的量,即為欲測(cè)抗體的量,其結(jié)果可用目測(cè)或用分光光度計(jì)定量測(cè)定。
操作步驟:
1.將抗原按5 μg/ml稀釋于碳酸鹽緩沖液(pH 9.6),100 μl /孔,4℃過(guò)夜。
2.次日PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。
3.加2%BSA封閉室溫1 h,200 μl /孔。
4.陽(yáng)性對(duì)照從10ug/ml,做倍必稀釋,待測(cè)血清從1:50做倍比稀釋,預(yù)試驗(yàn)后確定稀釋倍數(shù)及陽(yáng)性對(duì)照的起始濃度及稀釋數(shù)量(以可以做標(biāo)準(zhǔn)曲線為參數(shù)),室溫1h。
5.PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。
6.加入1:3000(不同公司有不同的稀釋度) PBS-T稀釋的HRP標(biāo)記的山羊抗人IgG,100 μl /孔,室溫1h。
7.PBS-T清洗4次(快1慢3,間隔5分鐘)。
8.小鼠elisa試劑盒顯色,100 μl /孔,顏色變深后中止顯色,2M硫酸在BIO-RAD酶標(biāo)儀上讀數(shù),可用ABTS,OPD,TMB等
UV法含量測(cè)定用 馬來(lái)酸 對(duì)照品 171250-200401 50mg
HPLC法含量測(cè)定用 對(duì)照品 171252-200401 50mg
HPLC法含量測(cè)定 對(duì)照品 171253-200401 100mg
TLC法有關(guān)物質(zhì)檢查 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(雜質(zhì)B) 對(duì)照品 171254-200401 100mg
鑒別 鹽酸 對(duì)照品 171256-200401 100mg
含量測(cè)定 銀杏酸 對(duì)照品 20mg
Oleuropein 橄欖苦苷 橄欖苦甙 32619-42-4 HPLC≥98% 20mg/支
Lobetyolin 黨參炔苷 黨參炔甙 136085-37-5 HPLC≥98% 10mg/支
Carnosic acid 鼠尾草酸 639426 HPLC≥98% 20mg/支
小鼠elisa試劑盒