當前位置:江蘇菲亞生物科技有限公司>>技術文章>>ELISA實驗中的封閉液小知識
ELISA試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
1、ELISA試劑盒實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用。
2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。(Tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結合或結合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現YY)
3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA試劑盒板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑”的作用。
4、蔗糖溶液一般在ELISA試劑盒板子經過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。
封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
封閉劑的原理就是與酶聯板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了,不會影響實驗的準確度。
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