細胞:ACHN細胞
中文名稱:人腎腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當的培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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活組織的發(fā)育和功能與細胞之間的溝通及互動有很大的關系,兩個細胞要在適當的距離或適切的時間才可能產生互動在一般情況下要誘騙細胞接近但彼此又不碰觸,對細胞生物學家來說是一大挑戰(zhàn)。
研究小組開發(fā)了一套微機電系統(tǒng),不需使用顯微設備或機械控制手臂,即可讓兩個細胞十分接近或完_全分開。此系統(tǒng)包含二片分開的梳子型構造,在梳子上面黏附活細胞,在兩種不同的設定下,會使裝置恰好吻合。
其中一種設定會使兩種細胞在梳子邊緣近距離接近,而另一種設定則可使細胞保持大約80微米的距離(大約是4個細胞寬度)。人手可以操縱這兩種設定以觀察兩種細胞之間的互動關系。利用這個系統(tǒng)觀察了肝細胞與支持基質細胞之間的動態(tài)互動關系,結果發(fā)現如果要維持肝細胞的原形
肝細胞必需與基質細胞近距離接觸大約18小時,然后兩種細胞分開,大約在325微米的距離時基質細胞會分泌可溶性訊息小分子到肝細胞表面,驅動肝細胞進行分化。
研究人員表示利用這個平臺可以觀察到各式細胞之間互動的動態(tài)情況,也可應用于許多細胞實驗的研究如胚胎形成的過程或者疾病形成的過程等等。