細胞:SW-13細胞
中文名稱:人腎上腺皮質腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
培養基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程( 請嚴格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養瓶中的培養基,PBS 緩沖液潤洗細胞兩次,加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰_酶,加 6~8ml 培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
3. 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養。
4. 注意培養基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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通過皮膚細胞中的纖維原細胞來尋找控制重新編譯過程的基因。
一個生物體內的所有細胞擁有相同的基因,但細胞的基因活動的形式卻有所不同,這種活動形式最終決定了細胞是成為干細胞還是分化成成人細胞兩種不同的路徑。
在克隆干細胞的過程中,卵細胞中某些不為人知的因素會關閉生成神經等細胞的基因,同時開啟只有胚胎中表達的基因。
通過熒光標記物來識別出對重新編譯過程非常重要的基因,然后直接利用這個基因來激活成人細胞,誘導成人細胞核自己進行重新編譯,生成干細胞系。
重新編譯細胞的過程可以在實驗室中直接進行了,這對治療性克隆的研究來說將是一個巨大突破。
一旦掌握了這一過程,就會創造出其他新的技術,直接將成人細胞轉變成干細胞,這些技術將因不再需要生成和破壞人類胚胎而消除人們圍繞克隆干細胞的倫理爭論;
由于這些技術不再需要人類卵子的供應,克隆的效率和運用范圍將會大大提高,再生藥物也將迎來全新的時代,干細胞移植也會適用于任何有所需要的人。
這一科學設想的實現已經做了一些初步工作。已經在未分化的干細胞中識別出一系列非活性基因,一旦被激活,這些基因就會產生轉錄因子,使干細胞發育成不同的成人細胞。
科研人員還在想方設法通過基因改變胚胎特性,改變過的基因將使胚胎不會發育成人類,從而可以避免破壞生命的倫理之爭。
核移植克隆技術只是必須經過的過渡性技術,人類最終會以此為基礎開發出更新的技術,使胚胎干細胞從倫理爭論中解放出來。核移植是目前進行重新編譯可以選擇的途徑,而只有不斷認識這一過程,才能找到跨越或取代這一過程的其他選擇。