細(xì)胞：A9細(xì)胞
中文名稱：小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
電壓門控鉀離子通道是分布類型最多的一類離子通道，它存在于所有的真核細(xì)胞內(nèi)，主要參與細(xì)胞膜靜息電位和動作電位復(fù)極化過程的調(diào)節(jié)，決定著動作電位的發(fā)放頻率和幅度。(人MG63細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人骨肉瘤細(xì)胞)
鉀通道是大約50個(gè)基因編碼的α亞單位的聚合物，單個(gè)鉀通道是同源四聚體，4個(gè)亞基對稱的圍成一個(gè)傳導(dǎo)離子的中央孔道，恰好讓單個(gè)鉀離子通過。(人143B細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人骨肉瘤細(xì)胞)
心臟和內(nèi)耳中的鈉離子通道是由KCNQ1(Q1)編碼的α亞基和KCNE1(E1)編碼的β亞單位組成。Q1和E1的遺傳性突變與心律失常和耳聾有關(guān)。(人CNE-1細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人鼻咽癌細(xì)胞)
構(gòu)建一個(gè)鉀離子通道到底需要多少數(shù)量的KCNE1蛋白。理論上是1到14之間的任何一個(gè)值。這些通道是由2個(gè)E1構(gòu)建而成。對這個(gè)通道構(gòu)造的了解，是理解威脅生命的心臟疾病(例如心律失常)和治療這些疾病的藥物開發(fā)的關(guān)鍵所在。(人SUNE-2細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人鼻咽癌細(xì)胞)
一次單一的心跳是心臟肌肉緩慢的擴(kuò)張和收縮。在某種程度上，心跳可以受心臟細(xì)胞表面的一系列通道控制，這些通道能夠調(diào)控不同離子進(jìn)出細(xì)胞的運(yùn)動。(小鼠4T1細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 小鼠乳癌細(xì)胞)
鉀離子通道，是由蛋白Q1和E1組成，對于結(jié)束每一次心臟收縮是至關(guān)重要的。Q1構(gòu)建鉀離子流經(jīng)的孔道，E1s控制這個(gè)孔道如何緩慢的打開和關(guān)閉、每個(gè)細(xì)胞表面有多少通道以及它們?nèi)绾伪凰幬镎{(diào)控。(猴CV-1細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 非洲綠猴腎細(xì)胞)
研究小組以超高的檢測靈敏度，在哺乳動物活細(xì)胞內(nèi)觀察到了E1，計(jì)算了單個(gè)通道中的蛋白質(zhì)，而在這個(gè)研究領(lǐng)域中這些事情從來沒有做過。(猴Cos7細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)
使用三種不同的方法來計(jì)算E1，包括用不同的熒光染料標(biāo)注它們，以及使用一種蝎毒素結(jié)合Q1。在每種方法中，都得到了相同的結(jié)果。(人THP-1細(xì)胞 來源：通派細(xì)胞庫 人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)
結(jié)果表明，具有高水平E1的細(xì)胞中的鉀離子通道，E1亞單位不超過2個(gè)。具有低水平E1的細(xì)胞產(chǎn)生的鉀離子通道(2個(gè)E1亞單位)和Q1通道(沒有E1亞基)——具有1個(gè)E1亞基的通道似乎不能形成或被限制不能在細(xì)胞表面表達(dá)。
