試劑盒的常見背景問題解析
zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種關閉液廉價、安穩，在去掉洗刷過程中的一些非特異上很有用。但它們只在存在時起作用，由于很簡單被洗掉。因而一切洗刷液中也有必要添加關閉液。請勿運用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會下降特異，發作假陰性。另一個挑選是運用蛋白和非離子型去污劑這兩種關閉液，后者可幫忙洗刷過程中的關閉。
關閉更要害
關閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中潛在的位點。這就下降了可發作信號的抗體非特異的機會。您當然也期望抗體只與意圖蛋白吧。假如您的布景過高，置疑關閉不充分，那么您能夠測驗運用更高濃度的關閉液，或恰當延伸關閉時刻。
假如您一向被布景疑問所困惑，那么或許您該花些時刻來優化關閉液。這也許需求時刻，但也是值得的。目前主要有兩種類型的關閉液：蛋白和非離子型去污劑。您運用的類型須取決于多個要素，包含微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢查試劑。好的關閉液應下降非特異性，但它不應當與抗原、抗體或檢查試劑發作相互作用。
洗刷很主要
洗刷過程看似很無聊，本來很主要，由于假如未的資料（如非特異的抗體或檢查試劑）殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。如有必要，可添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻撓非特異反應。假如布景過高，而您置疑洗刷不行時，能夠測驗添加洗刷次數。
抗體濃度須優化
咱們通常會follow師兄師姐留下來的操作過程，但是假如試劑稍有不同，則也許需求優化抗體的量。記住，非特異的抗體會添加布景。為了避免這一點，切勿運用過多的一抗或二抗。
檢查試劑要適當
ELISA試驗的原理好像很簡單，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗刷和關閉。但是，即使是平鋪直敘的洗刷和關閉，假如做得不太好，也有也許毀了全部試驗。在試驗結束時，咱們是否能取得有意義的信息，這在很大程度上取決于成果的信噪比。布景噪音會影響您對成果的判別。怎么下降ELISA的布景，下面有一些tips。
