大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒用于標記ELISA試劑盒里抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:
1、有高度的活性和敏感性;
2、在室溫下穩定;
3、反應產物易于顯現;
4、能商品化生產。
當前應用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應用zui廣。
標本的采集及保存:
1.血清:標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8℃1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒操作步驟
各試劑在使用前平衡至室溫。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。除空白孔外,余孔分別加標準溶液或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,輕輕混勻,酶標板加上蓋,37℃反應120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。
3. 每孔加檢測溶液A工作液 100ul,37℃,60分鐘。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
4. 每孔加檢測溶液B工作液 100ul,37℃,60分鐘,洗板5次,甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色30分鐘(此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯)。
6. 依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(此時蘭色立轉黃色)。用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
注意:
1.每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2NH2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
2.為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內。
結果判斷與分析:
1、 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的LTB4標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的LTB4含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
大鼠利鈉肽受體1(NPR1)ELISA試劑盒葡萄糖肉浸液肉湯 250g 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(GB標準)
Dextrose Meat Infusion Broth
匹克氏肉湯基礎 A 100g 用于溶血性鏈球菌的增菌培養(GB標準)
Pick's Broth ZIKERse A
肉浸液肉湯培養基 250g 用于溶血性鏈球菌和蠟樣芽孢桿菌的培養(GB標準)
Meat Infusion Broth
疊氮鈉葡萄糖肉湯 250g 用于鏈球菌的增菌培養
Aziode Dextrose Broth
乙基紫疊氮鈉肉湯 250g 用于鏈球菌的增菌培養
Ethyl Violet Aziode Broth
KF鏈球菌瓊脂 100g 用于鏈球菌的選擇性分離及計數(SN標準)
KF Streptococcus Agar