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主要用途
GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶標記試劑是一種旨在使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依賴性蛋白激酶A(protein kinase K),標記純化的目標融合蛋白,成為敏感探針的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。適合于各種GST融合的重組蛋白。其應用于后續遠西方雜交(FAR WESTERN BLOT) 印跡實驗和印跡覆膜結合(BLOT OVERLAY BINDING)實驗等。產品即到即用,性能穩定,操作便捷,反應敏感,重復性好。
技術背景
谷胱甘肽-S-轉移酶(glutathione-S-transferase;GST)融合蛋白(fusion protein)的技術,廣泛應用于蛋白與蛋白之間相互作用的研究、抗體的制造和純化、以及生化分析。基于GST融合蛋白由GSTmoietry、蛋白酶切離部位和已知激酶磷酸化部位構成,使用同位素([γ32P]ATP)和cAMP依賴性蛋白激酶A(protein kinase K),標記純化的目標融合蛋白,作為敏感的探針,在遠西方雜交(FAR WESTERN BLOT) 印跡實驗或印跡覆膜結合(BLOT OVERLAY BINDING)實驗中,探測和分析結合蛋白或多肽結構域。GST融合蛋白同位素([γ32P]ATP)激酶標記是蛋白組學研究的常用工具。
用戶自備
[γ32P]ATP 同位素:用于同位素標記
1.5毫升離心管:用于樣品反應操作和保存的容器
干式恒溫儀:用于標記孵育
液體閃爍計數器(liquid scintillation counter):用于同位素活性測定
注意事項
1.本產品為20次操作
2.本產品的標記效率可達60%以上
3.操作時,須戴手套
4.操作時,嚴格無菌
5.同位素操作須嚴格遵守規章制度
6.建議使用帶濾芯的槍頭進行操作
7.同位素[γ32P]ATP(1居里=37GBq),建議使用ICN或AMERSHAM(安瑪西亞)公司
8.由于[γ32P]同位素的半衰期短,建議使用新鮮同位素材料;且標記后即刻使用
9.可以直接在GST融合蛋白樹脂上進行標記,然后常規洗脫或凝血酶(THROMBIN)切離純化;純化后進行同位素活性測定
10.本公司提供系列同位素處理試劑產品
質量標準
1.本產品經鑒定性能穩定
2.本產品經鑒定不含污染性蛋白酶和核酶
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