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上海拜力生物科技有限公司

技術(shù)指導(dǎo)詳解 Western Blotting

時(shí)間:2016-12-19閱讀:810

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  Western Blotting 基因工程技術(shù)

  理論依據(jù):不同基因具有相同的物質(zhì)基礎(chǔ)。

            基因是可切割的。

            基因是可以轉(zhuǎn)移的。

            多肽與基因之間存在對應(yīng)關(guān)系。

            遺傳密碼是通用的。

            基因可以通過復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一代。

  Western Blotting 基因工程技術(shù)

  可提供:

  (1)從現(xiàn)有的生物有機(jī)體基因組中,經(jīng)過酶切消化或PCR擴(kuò)增等方法,獲得帶有目的基因的片段。

  (2)在體外,將帶有目的基因的外源片段連接到具有選擇標(biāo)記的載體分子上,形成能夠自主復(fù)制的重組DNA分子。

  (3)將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適宜的受體細(xì)胞,并使其一起增殖。

  (4)從大量的細(xì)胞繁殖群體中,篩選出獲得了重組DNA分子的受體細(xì)胞克隆。

  (5)由篩選出來的受體細(xì)胞克隆,提取出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因,供進(jìn)一步分析研究使用。

  (6)將分離到的目的基因克隆到表達(dá)載體上,導(dǎo)入受體細(xì)胞,使之在新的遺傳背景下實(shí)現(xiàn)功能表達(dá),產(chǎn)生出人類所需要的物質(zhì)。

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  小徐20161219

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